[发明专利]牦牛乳酪蛋白抗氧化肽的制备方法

权利要求书

1.一种牦牛乳酪蛋白抗氧化肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）牦牛乳酪蛋白溶解：称取牦牛乳酪蛋白20g～40g，加水500mL，调节反应温度30℃～60℃，pH7.0～9.0，搅拌，使牦牛乳酪蛋白溶解；

（2）加碱性蛋白酶水解：吸取250μL～500μL酶液，维持反应温度30℃～60℃，pH7.0～9.0，反应1～4小时；

（3）灭活碱性蛋白酶，升温至80℃～100℃，维持15～30分钟；

（4）沉淀酪蛋白：用5mol/L盐酸调节pH到4.1～4.6，使酪蛋白在其等电点处析出；

（5）离心：4000g～10000g离心力，离心5～30分钟，离心除去酪蛋白沉淀，留上清液；

（6）超滤：取离心后上清液，过截留量6000Da的超滤膜，收集透过液，除去大分子蛋白及多肽；

（7）喷雾干燥：取步骤（6）中的超滤透过液，采用喷雾干燥机进行喷干，得到牦牛乳酪蛋白抗氧化肽。

2.如权利要求1所述的牦牛乳酪蛋白抗氧化肽的制备方法，其特征在于，步骤还包括有：

在步骤（6）超滤后还包括有纳滤步骤：取超滤透过液，通过截留分子量为200Da的纳滤膜，收集回流液，除去小分子盐和氨基酸；然后进行喷雾干燥步骤：取纳滤回流液，采用喷雾干燥机进行喷干，得到牦牛乳酪蛋白抗氧化肽。

3.如权利要求1所述的牦牛乳酪蛋白抗氧化肽的制备方法，其特征在于，所述的牦牛乳酪蛋白为食品级牦牛乳酪蛋白；所述的碱性蛋白酶为食品级碱性蛋白酶；所述的盐酸为食用级盐酸。

4.如权利要求1所述的牦牛乳酪蛋白抗氧化肽的制备方法，其特征在于，所选用的酶制剂为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶其中的一种。