[发明专利]鸡新城疫和H9N2亚型禽流感二联灭活疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种鸡新城疫和H9N2亚型禽流感二联灭活疫苗，其特征在于：含有鸡新城疫病毒La Sota株和禽流感病毒A/chicken/He Nan/03/2009/(H9N2)株；所述禽流感病毒A/chicken/He Nan/03/2009/(H9N2)株缩写为H9N2亚型禽流感病毒HN03株，保藏号为CGMCC NO：6258。

2.根据权利要求1所述鸡新城疫和H9N2亚型禽流感二联灭活疫苗，其特征在于所述鸡新城疫病毒La Sota株和H9N2亚型禽流感病毒HN03株的含量比为2: 1～3。

3.一种制备权利要求1所述鸡新城疫和H9N2亚型禽流感二联灭活疫苗，其特征在于：包括如下步骤：

（1） 病毒液的制备：将鸡新城疫病毒La Sota株和H9N2亚型禽流感病毒HN03株分别接种SPF鸡胚，分别收获鸡胚液，作为鸡新城疫病毒La Sota株病毒液和H9N2亚型禽流感病毒HN03株病毒液；

（2）病毒液的浓缩与灭活：将鸡新城疫病毒La Sota株病毒液和H9N2亚型禽流感病毒HN03株病毒液分别浓缩，然后分别加入β-丙内酯获得鸡新城疫病毒La Sota株灭活病毒液和H9N2亚型禽流感病毒HN03株灭活病毒液；

（3）水相制备：将鸡新城疫病毒La Sota株灭活病毒液和H9N2亚型禽流感病毒HN03株灭活病毒液混合，获得混合病毒液；将混合病毒液与吐温-80混合，制得水相；

（4）油相制备：将注射用白油和司本－80混匀，作为油相；

（5）乳化：将水相和油相混合均匀，即得鸡新城疫和H9N2亚型禽流感二联灭活疫苗。

4.根据权利要求3所述鸡新城疫和H9N2亚型禽流感二联灭活疫苗，其特征在于：步骤（2）中，所述鸡新城疫病毒La Sota株病毒液浓缩至每0.1毫升浓缩后鸡新城疫病毒液中病毒含量为3×10^8.0 EID₅₀～3×10^9.0EID₅₀；所述H9N2亚型禽流感病毒HN03株病毒液浓缩至每0.1毫升浓缩后禽流感H9病毒液中病毒含量为3×10^8.0 EID₅₀～3×10^8.5EID₅₀。

5.根据权利要求3或4所述鸡新城疫和H9N2亚型禽流感二联灭活疫苗，其特征在于：所述步骤（2）中各灭活病毒液中β-丙内酯的体积百分数为0.04%～0.06%。

6.根据权利要求5所述鸡新城疫和H9N2亚型禽流感二联灭活疫苗，其特征在于：步骤（3）中所述混合病毒液中鸡新城疫病毒La Sota株灭活病毒液与H9N2亚型禽流感病毒HN03株灭活病毒液的体积比为2:1～3。

7.根据权利要求6所述鸡新城疫和H9N2亚型禽流感二联灭活疫苗，其特征在于步骤（3）中所述混合病毒液与吐温-80混合的体积比为96∶4。

8.根据权利要求7所述鸡新城疫和H9N2亚型禽流感二联灭活疫苗，其特征在于步骤（4）中所述注射用白油和司本－80混合的体积比为94∶6。

9.根据权利要求8所述鸡新城疫和H9N2亚型禽流感二联灭活疫苗，其特征在于步骤（5）所述水相和油相混合的体积比为1:3。