[发明专利]从大黄中分离三种二苯乙烯苷类单体化合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及trans-rhapontin、cis-rhapontin和trans-desoxyrhaponticin三种二苯乙烯苷类单体化合物的制备方法，尤其涉及从大黄中分离三种二苯乙烯苷类单体化合物的制备方法。

背景技术

二苯乙烯苷又称芪多酚，属多羟基芪类化合物（polyhydrostilbenes)，广泛存在于藓类和高级植物中。二苯乙烯苷被鉴定为一种植物抗毒素，是由植物在真菌感染、紫外线照射、机械损伤等不利条件下产生的。研究发现，二苯乙烯苷具有多种生理活性与药用价值，已在降血脂、抗衰老、抑制肿瘤等方面显示出功能性，这在当今日趋老龄化的社会中凸现其重要的研究和开发价值。

高速逆流色谱(High-speed Countercurrent Chromatography，简称HSCCC)是不使用固态支撑体或载体的液液分配色谱技术, 具有应用范围广，适应性好；操作简便，容易掌握；回收率高；重现性好；分离效率高，分离量较大的优点，它克服了固相载体对样品的吸附损失、变性等缺点，样品回收率高，已被广泛应用于天然药物成分的分析鉴定及分离制备。与其它柱色谱相比较，它克服了固定相载体带来的样品吸附、损失、污染和峰形拖尾等缺点。国内外的研究表明，HSCCC技术已经从农产品、中草药等天然产物中分离纯化与制备了数百种单体成分，这些成分包括黄酮类、生物碱类、蒽醌类、皂苷类、大环内酯类、多酚类、儿茶素类、多糖类、糖蛋白类等物质。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种简便、快速、成本低廉的从大黄中分离三种二苯乙烯苷类单体化合物的制备方法。

为解决上述问题，本发明所述的从大黄中分离三种二苯乙烯苷类单体化合物的制备方法，包括以下步骤：

⑴将粉碎的大黄根采用质量浓度为30%~95%的酒精在40~80℃下进行热回流提取，提取1~4次、每次1~3h，合并得到提取液；

⑵将所述提取液在温度为30~80℃、压力为0.05~0.08MPa的条件下减压蒸干，得到大黄提取物；

⑶将所述大黄提取物先用去离子水溶解，再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取2~10次，剩余水相部分即为大黄水提物；

⑷将所述大黄水提物上非极性大孔树脂柱，用2~50倍柱床体积、质量浓度为50~95%乙醇水溶液洗脱，得到含有二苯乙烯苷类物质的洗脱液，该洗脱液在温度为30~80℃、压力为0.05~0.08MPa的条件下蒸干，即得二苯乙烯苷粗提物；

⑸所述二苯乙烯苷粗提物采用高速逆流色谱设备，在氯仿-正丁醇-甲醇-水体系中以转速为500~1000r/min、温度为20~50℃的条件对其进行分离，即可分别得到反式土大黄苷（trans-rhapontin）、 顺式土大黄苷（cis-rhapontin）、反式去氧土大黄苷（trans-desoxyrhaponticin）三种二苯乙烯苷类物质。

所述步骤⑶中大黄提取物与所述去离子水的质量体积比为1：1~10。

所述步骤⑸氯仿-正丁醇-甲醇-水体系中氯仿、正丁醇、甲醇、水的体积比为4：0.1~2：3：1~5。

本发明与现有技术相比具有以下优点：

1、本发明采用高速逆流色谱（HSCCC）分离技术，与传统柱色谱分离技术相比，不但有效地缩短了分离时间，减少了工艺过程中的有机溶剂消耗和能耗。

2、本发明一次分离可以同时得到的三种高纯度二苯乙烯苷类单体化合物、性质稳定，纯度高（可达到97%以上），可应用于医药、标准物质、保健食品和保健药物等。

3、本发明采用HSCCC分离技术，该方法重现性高、简单、快速、可以有效地减少传统固液分离中的样品损耗问题。

4、由于本发明采用原料资源量丰富的大黄根作为原料，因此，有效地降低了生产成本。

具体实施方式

实施例1   从大黄中分离三种二苯乙烯苷类单体化合物的制备方法，包括以下步骤：

⑴将粉碎的大黄根采用质量浓度为30%的酒精在40℃下进行热回流提取，提取1次、每次1h，合并得到提取液。

⑵将提取液在温度为30℃、压力为0.05MPa的条件下减压蒸干，得到大黄提取物。

⑶将大黄提取物先用去离子水溶解，再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取2次，剩余水相部分即为大黄水提物；其中大黄提取物与去离子水的质量体积比（kg/ml）为1：1。