[发明专利]卡泊芬净前体pneumocandinB0组分的纯化方法有效
申请号: | 201210326890.6 | 申请日: | 2012-09-06 |
公开(公告)号: | CN102816207A | 公开(公告)日: | 2012-12-12 |
发明(设计)人: | 朱辉;张翠英;邹敬源;朱春燕;龙燕;黄运昌;杨益;陈茂林;杨旭成 | 申请(专利权)人: | 成都雅途生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C07K1/20;C07K1/16 |
代理公司: | 成都行之专利代理事务所(普通合伙) 51220 | 代理人: | 谢敏 |
地址: | 610000 四川省成都市高新*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 卡泊芬净前体 pneumocandinb sub 组分 纯化 方法 | ||
1.一种卡泊芬净前体pneumocandinB0组分的纯化方法,其特征在于:所述的纯化方法包括以下步骤:
步骤1,将PB0组分粗品进行反相柱层析,收集并减压浓缩,得到半纯品;
步骤2,将步骤1中所得PB0半纯品上正相柱层析,得高纯度PB0组分,正反相液相分析,色谱纯度均大于95%。
2.根据权利要求1所述的卡泊芬净前体pneumocandinB0组分的纯化方法,其特征在于:所述的步骤1中所使用的反相层析柱为C8或C18, 反相层析柱的柱料的粒径为20~50um。
3.根据权利要求1所述的卡泊芬净前体pneumocandinB0组分的纯化方法,其特征在于:步骤2中所述的正相柱柱料是普通正相硅胶上键合有氰基(CN),其粒径为200~300目。
4.根据权利要求1所述的卡泊芬净前体pneumocandinB0组分的纯化方法,其特征在于:步骤1中所述的将PB0组分粗品进行反相柱层析具体包括以下步骤:
步骤1-1,用体积百分比为95%的乙醇装柱,再用体积百分比为45%的乙醇,该溶液同时含有体积百分比为1‰的甲酸,平衡柱子;
步骤1-2,上样;
步骤1-3,用体积百分比为50%的乙醇,该溶液同时含有体积百分比为1‰的甲酸,冲洗柱子,之后再用此溶液进行解析;
步骤1-4,分段收集,将所需收集液减压浓缩,得到半纯品。
5.根据权利要求3所述的卡泊芬净前体pneumocandinB0组分的纯化方法,其特征在于:在进行步骤1-2上样之前,需要用体积百分比为45%的乙醇溶液溶解PB0组分粗品,溶解后样品浓度为5~10g/L,再用甲酸调pH值为3.0—4.0,然后再上样。
6.根据权利要求1所述的卡泊芬净前体pneumocandinB0组分的纯化方法,其特征在于:所述的步骤1中反相柱层析的解析剂是体积百分比为55%—58%的乙醇,同时该溶液中含体积百分比为1‰的甲酸。
7.根据权利要求1所述的卡泊芬净前体pneumocandinB0组分的纯化方法,其特征在于:步骤2中所述的正相柱层析采用干法上样,具体方法为:将步骤1中所得半成品与正相氰基硅胶以重量比为1:5的比例进行混合,搅拌均匀后倒入层析柱中。
8.根据权利要求1所述的卡泊芬净前体pneumocandinB0组分的纯化方法,其特征在于:所述的步骤2中进行正相柱层析时,在上样前,先用体积比为乙酸乙酯:甲醇:水=82: 10:8的溶液平衡柱子,上样后,继续用此溶液作为解析剂进行解析。
9.根据权利要求8所述的卡泊芬净前体pneumocandinB0组分的纯化方法,其特征在于:所述的水中含有体积比为1‰~2‰的氯化钠。
10.根据权利要求1所述的卡泊芬净前体pneumocandinB0组分的纯化方法,其特征在于:步骤1中所述的减压浓缩温度为45~60℃。
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