[发明专利]一种从植物提取物中筛选甘油三酯酶抑制剂的方法有效
| 申请号： | 201210328036.3 | 申请日： | 2012-09-07 |
| 公开（公告）号： | CN102824756A | 公开（公告）日： | 2012-12-19 |
| 发明（设计）人： | 程翼宇;王毅 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | B01D15/08 | 分类号： | B01D15/08;C07H17/07;C07H1/08;A61P3/10 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 植物 提取物 筛选 甘油 三酯酶 抑制剂 方法 | ||
1.一种从植物提取物中筛选甘油三酯酶抑制剂的方法，包括利用吸附载体进行酶的固定化，以及利用负载有酶的吸附载体从植物提取物中亲和选择分离出活性化合物，其特征在于，所述吸附载体为中空纤维。
2.如权利要求1所述的从植物提取物中筛选甘油三酯酶抑制剂的方法，其特征在于，所述吸附载体为聚丙烯中空纤维。
3.如权利要求1所述的从植物提取物中筛选甘油三酯酶抑制剂的方法，其特征在于，所述酶的固定化方法为：
(1)将中空纤维浸泡在乙醇中活化；
(2)取出中空纤维用去离子水清洗；
(3)活化好的中空纤维垂直放入酶溶液中，搅拌孵育。
4.如权利要求1所述的从植物提取物中筛选甘油三酯酶抑制剂的方法，其特征在于，所述活性化合物的亲和选择分离的方法为：
(1)取植物提取物水溶液，加入吸附酶的中空纤维，进行孵育；
(2)取出经孵育的吸附酶的中空纤维，经磷酸缓冲液清洗、乙腈水溶液洗脱后，收集洗脱液进行活性成分的分析；
(3)根据分析鉴定结果，采用制备液相色谱获取活性化合物。
5.如权利要求4所述的从植物提取物中筛选甘油三酯酶抑制剂的方法，其特征在于，所述孵育时间为10～60min，孵育温度为15～37℃。
6.如权利要求5所述的从植物提取物中筛选甘油三酯酶抑制剂的方法，其特征在于，所述孵育时间为30min，孵育温度为37℃。
7.如权利要求4所述的从植物提取物中筛选甘油三酯酶抑制剂的方法，其特征在于，所述磷酸缓冲液的离子强度为50～1000mM，磷酸缓冲液的pH值为5.6～8.0。
8.如权利要求7所述的从植物提取物中筛选甘油三酯酶抑制剂的方法，其特征在于，所述磷酸缓冲液的离子强度为50mM，磷酸缓冲液的pH值为6.8。
9.如权利要求4所述的从植物提取物中筛选甘油三酯酶抑制剂的方法，其特征在于，所述乙腈水溶液中乙腈的体积百分比浓度为10％。
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