[发明专利]装载有抗癌药物的透明质酸纳米微凝胶及其制备方法

权利要求书

1.一种装载有抗癌药物的透明质酸纳米微凝胶，其特征在于，凝胶颗粒粒径在100~500nm尺度范围内，水溶性抗癌药物被锁在透明质酸纳米微凝胶空间网络结构中。

2.根据权利要求1所述的装载有抗癌药物的透明质酸纳米微凝胶，其特征在于，所述水溶性抗癌药物包括盐酸阿霉素。

3.一种装载有抗癌药物的透明质酸纳米微凝胶制备方法，其特征在于，首先用酰肼类化合物将透明质酸分子上的羧基转化成氨基，得氨基化透明质酸；其次用琥珀酰亚胺活化生物素，得活化生物素；第三在1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐存在的条件下，将活化生物素接枝到氨基化透明质酸分子上，得生物素化透明质酸；第四将水溶性抗癌药物和中性亲和素与生物素化透明质酸溶解在水中，得装载有抗癌药物的透明质酸纳米微凝胶。

4.根据权利要求3所述的装载有抗癌药物的透明质酸纳米微凝胶制备方法，其特征在于，所述透明质酸为高分子量透明质酸，分子量为1.5~1.8 MDa，所述酰肼类化合物为己二酸二酰肼；获得氨基化透明质酸的具体方法为：己二酸二酰肼和高分子透明质酸的质量比为1:5，己二酸二酰肼的用量为0.1 mol equiv，分别溶于水中，透明质酸的浓度为2.5 mg/ml，然后将二者各自的水溶液混合，再加入己二酸二酰肼质量的十五分之一的固体1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐，室温搅拌1~4小时，在改性反应过程中用0.1 mol/L的盐酸调节反应溶液的pH值，使其保持在3.5~4.7范围内，得氨基化透明质酸。

5.根据权利要求3所述的装载有抗癌药物的透明质酸纳米微凝胶制备方法，其特征在于，所述琥珀酰亚胺为N-羟基琥珀酰亚胺；获得活化生物素的具体方法为：生物素与N-羟基琥珀酰亚胺等摩尔，与二环己基碳二亚胺一同溶于二甲基甲酰胺溶液中，50℃水浴缩合反应10~20小时；用布氏漏斗滤除不溶性N,N'-二环己基脲(DCU)白色沉淀杂质；在滤液中逐渐加入乙醚进行琥珀酰亚胺活化生物素的沉降，当不再明显出现琥珀酰亚胺活化生物素白色沉淀物时，将该白色沉淀物放入冰浴中1小时，摇匀，过滤，收集白色沉淀物。将白色沉淀物用50~60℃的热异丙醇溶解，再将其置于冰浴中超过3小时至沉降完全，过滤，收集沉降物；用二甲基甲酰胺溶解该沉降物，再加入乙醚并放在冰浴中1小时以上，过滤收集沉降物，再用乙醚提取一次。最后用干燥剂五氧化二磷对过滤收集的沉降物进行干燥处理，得到N-羟基琥珀酰亚胺活化生物素。

6.根据权利要求3所述的装载有抗癌药物的透明质酸纳米微凝胶制备方法，其特征在于，获得生物素化透明质酸的具体方法是：将质量比为22:1的氨基化透明质酸和N-羟基琥珀酰亚胺活化生物素用pH值为7.4的磷酸盐缓冲溶液溶解，室温下反应24小时，将反应产物用MWCO of 10000透析袋于二次水中透析24小时以上，冻干，得到生物素化透明质酸。

7.根据权利要求3所述的装载有抗癌药物的透明质酸纳米微凝胶制备方法，其特征在于，所述水溶性抗肿瘤药物为盐酸阿霉素；获得装载有抗癌药物靶的透明质酸纳米微凝胶具体方法是：将质量比为5:1的生物素化透明质酸和盐酸阿霉素在水中均匀混合，磁力搅拌逐滴加入中性亲和素水溶液，磁力搅拌速度40~800r/min，中性亲和素滴加速度5秒钟1滴，借助大分子量透明质酸自身构象卷曲控制中性亲和素与生物素的结合，实现凝胶结构形态从宏观到纳米微观的过渡。