[发明专利]一种醋酸去氨加压素的制备方法

权利要求书

1.一种醋酸去氨加压素的制备方法，其特征在于具体制备方法如下：

（1）制备Fmoc-Gly-AM Resin：

Rink AM Resin用二氯甲烷浸泡至充分溶胀，用N,N-二甲基甲酰胺洗涤，然后用25%哌啶/N,N-二甲基甲酰胺脱Fmoc保护基，洗涤后得到A产物；

取Fmoc-Gly-OH，1-羟基苯并三唑，N,N’-二异丙基碳二亚胺加入到无水N,N-二甲基甲酰胺中，在0~5℃活化后加入A产物，在25~35℃反应2~4 h后洗涤，得到Fmoc-Gly-AM Resin；

（2）制备Mpa(trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(trt)-Asn(trt)-Cys(trt)-Pro-D-Arg-Gly-AM Resin：

将步骤（1）所得Fmoc-Gly-AM Resin加入固相合成管中，用25%哌啶/N,N-二甲基甲酰胺脱Fmoc-Gly-AM Resin上的Fmoc保护基，，洗涤后得到B产物；

取Fmoc-D-Arg-OH，1-羟基苯并三唑，N,N’-二异丙基碳二亚胺加入到无水N,N-二甲基甲酰胺中，在0~5℃活化后加入B产物，在25~35℃反应1~3 h后洗涤，得到Fmoc- D-Arg-Gly-AM Resin；

重复上述过程，依次偶联Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Cys(trt)-OH、Fmoc-Asn(trt)- OH、Fmoc-Gln（trt）-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Mpa(trt)-OH，全部偶联完毕后，得到Mpa(trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(trt)-Asn(trt)-Cys(trt)-Pro-D- Arg-Gly-AM Resin；

（3）裂解Mpa(trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(trt)-Asn(trt)-Cys(trt)-Pro-D-Arg-Gly-AM Resin：

将三氟乙酸与苯甲硫醚按照质量比94:6混合配制成裂解液，取裂解液，加入步骤（2）制备好的Mpa(trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(trt)-Asn(trt)-Cys(trt)-Pro-D -Arg-Gly-AM Resin中，裂解初始温度为0~5℃，保持0.5~1h，逐渐升到20~30℃，保持1~2h，得到Mpa-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-D-Arg-Gly-NH₃；

（4）氧化成环：

将步骤（3）制备得到的Mpa-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-D-Arg-Gly-NH₃加入适量纯化水中，配制成2g/L溶液，加入氧化剂双氧水1ml/L氧化液，反应1.5~2.0h，得到Mpa-Cys成环的Mpa-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-D-Arg-Gly-NH₃；最后经过高效液相纯化和真空冻干得到高质量醋酸去氨加压素。