[发明专利]一种醋酸去氨加压素的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及多肽类药物生产技术领域，尤其是涉及一种制备醋酸去氨加压素的方法。

背景技术

醋酸去氨加压素，药物别名弥凝（Minirin），英文名称Desmopressin Acetate。是一种泌尿系统用药，主要用于中枢性尿崩症、夜间遗尿及血友病等，也用于肾尿液浓缩功能的测试，也可用作术后止血。

目前国内醋酸去氨加压素的制备方法主要由液相法和固相法。液相法产生较多废液，反应时间长，难纯化、后处理繁琐等问题，但在合适的浓度氧化成环效率极高，副产物较小。固相法合成Mpa(trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(trt)-Asn(trt)- Cys(trt)-Pro-D-Arg-Gly-AM Resin虽然高效简单，分子间成环肽产率极低，同时要求氨基树脂取代率较小等缺点。

发明内容

 针对现有技术存在的上述问题，本发明人提供了一种醋酸去氨加压素的制备方法。本方法具有高收率、低成本、环境友好、有利于规模化生产等优点。

本发明的技术方案如下：

一种醋酸去氨加压素的制备方法，具体制备方法如下：

（1）制备Fmoc-Gly-AM Resin：

Rink AM Resin用二氯甲烷浸泡至充分溶胀，用N,N-二甲基甲酰胺洗涤，然后用25%哌啶/N,N-二甲基甲酰胺脱Fmoc保护基，洗涤后得到A产物；

取Fmoc-Gly-OH，1-羟基苯并三唑，N,N’-二异丙基碳二亚胺加入到无水N,N-二甲基甲酰胺中，在0~5℃活化后加入A产物，在25~35℃反应2~4 h后洗涤，得到Fmoc-Gly-AM Resin；

（2）制备Mpa(trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(trt)-Asn(trt)-Cys(trt)-Pro-D-Arg-Gly-AM Resin：

将步骤（1）所得Fmoc-Gly-AM Resin加入固相合成管中，用25%哌啶/N,N-二甲基甲酰胺脱Fmoc-Gly-AM Resin上的Fmoc保护基，，洗涤后得到B产物；

取Fmoc-D-Arg-OH，1-羟基苯并三唑，N,N’-二异丙基碳二亚胺加入到无水N,N-二甲基甲酰胺中，在0~5℃活化后加入B产物，在25~35℃反应1~3 h后洗涤，得到Fmoc-D-Arg-Gly-AM Resin；

重复上述过程，依次偶联Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Cys(trt)-OH、Fmoc-Asn(trt)- OH、Fmoc-Gln(trt)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Mpa(trt)-OH，全部偶联完毕后，得到Mpa(trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(trt)-Asn(trt)-Cys(trt)-Pro-D-Arg-Gly -AM Resin；

  （3）裂解Mpa(trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(trt)-Asn(trt)-Cys(trt)-Pro-D-Arg-Gly-AM Resin：

将三氟乙酸与苯甲硫醚按照质量比94:6混合配制成裂解液，取裂解液，加入步骤（2）制备好的Mpa(trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(trt)-Asn(trt)-Cys(trt)-Pro-D-Arg- Gly-AM Resin中，裂解初始温度为0~5℃，保持0.5~1h，逐渐升到20~30℃，保持2h，得到Mpa-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-D-Arg-Gly-NH₃；

（4）氧化成环：

将步骤（3）Mpa-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-D-Arg-Gly-NH₃加入适量纯化水中，配制成2g/L溶液，加入氧化剂双氧水1ml/L氧化液，反应1.5~2.0h，得到Mpa-Cys成环的Mpa-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-D-Arg-Gly-NH₃；最后经过高效液相纯化和真空冻干得到高质量醋酸去氨加压素。

本发明有益的技术效果在于：

本发明操作简单，原料投料少，成本低，纯度高等优点，采用固-液结合的合成方法，具有固相合成法和和液相合成法高效，简单，同时也避免了二者的缺点：相比于液相法减少了大量废液，同时没有固相环化带来的聚合副产物，极大地提高了纯度和收率。

具体实施方式

下面对本发明进行具体描述。