[发明专利]一种两阶段溶氧控制提高多杀菌素产量的方法

权利要求书

1.一种两阶段溶氧控制提高多杀菌素产量的方法，在刺糖多孢菌发酵液制备阶段，当刺糖多孢菌发酵一开始时，调控初始氧体积传质系数k_La至100／小时-130／小时，促进刺糖多孢菌生物量积累；当发酵进入到菌体生长对数生长末期时，再调控初始氧体积传质系数k_La至60／小时-92／小时，促进多杀菌素合成与积累。

2.根据权利要求1所述的两阶段溶氧控制提高多杀菌素产量的方法，其特征在于，所述调控是指调节通气量和搅拌转速。

3.根据权利要求1所述的两阶段溶氧控制提高多杀菌素产量的方法，其特征在于，在刺糖多孢菌发酵液制备阶段之前，该方法还依次包括以下阶段：刺糖多孢菌的孢子制备阶段；刺糖多孢菌的一级种子液制备阶段；以及刺糖多孢菌的二级种子液制备阶段。

4.根据权利要求1、2或3所述的两阶段溶氧控制提高多杀菌素产量的方法，其特征在于，所述刺糖多孢菌的孢子制备阶段具体包括下述过程：

将刺糖多孢菌冻干管中的冻干粉转接进入斜面培养基中，活化后经过N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍化学诱变、紫外线物理诱变和原生质体融合，得到改良菌株；

所述斜面培养基中含有葡萄糖：10.0-15.0；酪蛋白：2.0-3.0；酵母粉：1.0-2.0；琼脂；15.0-20.0，单位均为克/升。

5.根据权利要求1、2或3所述的两阶段溶氧控制提高多杀菌素产量的方法，其特征在于，所述刺糖多孢菌的一级种子液制备阶段具体包括下述过程：

将所述刺糖多孢菌的孢子制备阶段制得的活化后刺糖多孢菌孢子接入刺糖多孢菌的一级种子培养基中，培养制得刺糖多孢菌一级种子液；

所述每升一级种子培养基含有葡萄糖：10.0-15.0；酵母粉：2.0-2.5；酪蛋白：2.0-2.5；K₂HPO₄：0.2-0.4；MgSO₄：0.3-0.4，单位均为克/升。

6.根据权利要求1、2或3所述的两阶段溶氧控制提高多杀菌素产量的方法，其特征在于，所述刺糖多孢菌的二级种子液制备阶段具体包括下述过程：

将所述刺糖多孢菌的一级种子液制备阶段制得的一级种子液以10%（v/v）接种量接入二级种子培养基中，培养制得刺糖多孢菌的二级种子液；

所述每升二级种子液培养基中含有葡萄糖：10.0-15.0；酵母粉：2.0-2.5；大豆蛋白胨：8.0-10.0；K₂HPO₄：0.2-0.4；MgSO₄：0.3-0.4，单位均为克/升。

7.根据权利要求1、2或3中任一所述的两阶段溶氧控制提高多杀菌素产量的方法，其特征在于，在所述刺糖多孢菌发酵液制备阶段中，在发酵开始前，是将所述刺糖多孢菌的二级种子液制备阶段制得的二级种子液以10%（v/v）接种量接入发酵培养基中，进行培养，所述每升发酵培养基中含有葡萄糖：60.0-70.0；麦芽糖：10.0-20.0；棉籽粉：20.0-25.0；大豆蛋白胨：8.0-10.0；酵母粉：20.0-25.0；CaCO₃：1.0-1.5；K₂HPO₄：0.2-0.4；豆油：10.0-15.0，单位均为克/升。

8.根据权利要求5中所述的两阶段溶氧控制提高多杀菌素产量的方法，其特征在于，在所述刺糖多孢菌发酵液制备阶段中，在发酵开始前，是将所述刺糖多孢菌的二级种子液制备阶段制得的二级种子液以10%（v/v）接种量接入发酵罐的发酵培养基中，进行培养，所述每升发酵培养基中含有葡萄糖：60.0-70.0；麦芽糖：10.0-20.0；棉籽粉：20.0-25.0；大豆蛋白胨：8.0-10.0；酵母粉：20.0-25.0；CaCO₃：1.0-1.5；K₂HPO₄：0.2-0.4；豆油：10.0-15.0，单位均为克/升。