[发明专利]中成药中人参DNA的PCR检测方法有效
申请号: | 201210338707.4 | 申请日: | 2012-09-13 |
公开(公告)号: | CN102827940A | 公开(公告)日: | 2012-12-19 |
发明(设计)人: | 唐卓;陈蓉 | 申请(专利权)人: | 中国科学院成都生物研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 成都赛恩斯知识产权代理事务所(普通合伙) 51212 | 代理人: | 张帆;肖国华 |
地址: | 610041 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 中成药 人参 dna pcr 检测 方法 | ||
1.一种中成药中人参DNA的PCR检测方法,其特征在于,所述方法是利用PCR扩增中成药中人参特异性的DNA来检测中成药中的人参DNA。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于:所检测中成药为含有拉丁学名为Panax ginseng C.A.Mey.、其别名或其炮制品的中成药。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法,其特征在于,所述方法包括下列步骤:
1)中成药中人参DNA的提取;
2)PCR反应;
3)PCR扩增产物分析。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤1)中对于中成药药材以药材粉末入药的剂型采用改良的CTAB法提取DNA;对于中成药药材以提取液入药的剂型采用乙醇重结晶的方法提取。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,其中所述的药材粉末入药的剂型包括片剂、胶囊和丸剂;所述的提取液入药的剂型包括口服液和注射液。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,对于DNA含量较高的样本采用普通PCR,对于DNA含量较低的样本采用巢式PCR。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述的普通PCR反应的正向引物和反向引物是以人参ITS2序列区域为模板设计的特异性引物,其目的条带可在80-224bp。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述的巢式PCR对总基因组DNA依次进行第一轮PCR和第二轮PCR两次扩增,第一轮PCR扩增产物的DNA片段可在700-1500bp,第二轮PCR与普通PCR相同。
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