[发明专利]樟树无性系组培繁育方法

权利要求书

1.樟树无性系组培繁育方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）外植体材料的消毒：取当年生嫩梢去掉叶片，切段，使每段为带有1~2个腋芽的茎段，茎段先用0.2%灭菌净消毒10～20min，无菌水清洗6次，再用0.1%升汞，2～5滴吐温80，处理3～5min，无菌水清洗6次，消毒后备用；（2）芽的诱导：把步骤（1）经消毒的茎段，接种到芽的诱导培养基上，经过6～15d的培养，在腋芽处开始萌动，并长出新芽，所述的诱导培养基为DCR_改＋6-BA 0.3mg+NAA 0.05～0.5mg； （3）芽的增殖：将步骤（2）长出的新芽培养30d后，将新芽切割下来，接到继代增殖培养基上培养，在增殖培养基培养6～15d，就会形成丛生芽，所述的增殖培养基为DCR_改＋6-BA 0.5～3mg +NAA 0.05～0.5mg +IAA 0.05～2mg或DCR_改＋6-BA 0.5～4mg +NAA 0.05～1mg； 

（4）生根诱导：步骤（3）的丛生芽的单芽长到1.5～2cm左右长时，选取叶片展开的单芽，分割下来接到生根培养基中诱导生根，在生根培养基中培养7～10d，茎基部诱导出根，所述的生根培养基为1/2MS+IBA 1.5～2.5mg +IAA 1.5～2.5mg +6-BA 0～0.5mg+NAA 0.05～0.5mg； （5）生根苗的炼苗：经过生根诱导，当苗诱导生根后，将瓶苗置于有70%遮荫的大棚中炼苗30～40d后，苗高3cm以上，可进行移栽；

（6）组培苗的移栽与管理：将步骤（5）进行炼苗的樟树苗移栽至消毒的基质上，移载时，把根放进预先打好的小孔中，使根系舒展，充分压实，使根土密接，要防止栽植过深、窝根或露根，移栽后浇透水；栽植后用塑料薄膜作小拱状盖好小苗保湿，遮荫60-80%；为防止病害，移苗后当天喷防病药剂800－1000倍菌毒清液或多菌灵一次，以后每周喷药剂一次，3d后逐渐打开塑料薄膜，15天后全部打开，待小苗长出新叶时方可开始薄施肥，1个月后，可进行正常的水肥管理。

2.根据权利要求1所述的樟树无性系组培繁育方法，其特征在于：步骤（6）所述的基质为泥炭土和黄心土配制而成的混合基质，其混合比为泥炭土:黄心土=1:4。

3.根据权利要求1所述的樟树无性系组培繁育方法，其特征在于：步骤（6）所述的消毒是采用0.1%高锰酸钾溶液消毒。

4.根据权利要求1所述的樟树无性系组培繁育方法，其特征在于：所述的诱导培养和增殖培养的培养基均添加蔗糖30g/L，生根阶段的培养基添加蔗糖20g/L，全部培养基均添加卡拉胶0.6～0.7%，pH值为5.8。

5.根据权利要求1所述的樟树无性系组培繁育方法，其特征在于：培养室的培养条件：培养条件25～30℃，每天光照12～16h，光照度为1500～3000lx。

6.根据权利要求1所述的樟树无性系组培繁育方法，其特征在于：所述的DCR_改培养基的组成及其含量为：NH₄NO₃800 mg/L、KNO₃ 680 mg/L、KH₂PO₄ 400 mg/L、CaCl₂·2H₂O 170 mg/L、Ca(NO₃)₂·4H₂O 1112 mg/L、MgSO₄·7H₂O 740 mg/L 、FeSO₄·7H₂O 27.8 mg/L 、Na₂-EDTA  37.3 mg/L 、MnSO₄·4H₂O 22.3 mg/L 、ZnSO₄·7H₂O 8.6 mg/L 、H₃BO₄ 6.2 mg/L 、KI 0.83 mg/L 、Na₂MoO₄·2H₂O 0.25 mg/L 、CuSO₄·5H₂O 0.025 mg/L 、CoCl₂·6H₂O 0.025 mg/L 、肌醇 100 mg/L 、甘氨酸 2 mg/L 、VB₁  0.1 mg/L 、VB₆ 0.5 mg/L 、VC 2 mg/L 、VB₃  0.5 mg/L 、L-半胱氨酸5 mg/L、糖 30000 mg/L 。