[发明专利]樟树无性系组培繁育方法

说明书

技术领域

    本发明涉及一种组培繁育方法，具体涉及樟树无性系组培繁育方法，属于林木组培繁育技术领域。 

背景技术

樟树（Cinnamomum camphora (L.) Presl），属樟科樟属树种，是常绿乔木，是国家二级保护树种。在华南地区，樟树是著名的多用途乡土珍贵树种和经济树种，分布范围广，开发利用程度高，家喻户晓，一直受到人们的高度重视。它除了是珍贵用材外，还可以提炼冰片、樟油等，其深加工产品在医药、光学及工业上应用广泛，与人们的生产和生活息息相关。目前可供木材和樟油提取的资源已经极为有限。天然分布的樟树大都是低产低质次生林，且多为零星分布，可利用的资源甚少。较好的樟树一般都是房前屋后的风水林、城市景观和道路绿化树木。近年来，随着人们环保意识和商品林建设能力的提高，大规模造林绿化广泛开展，樟树人工林开始大量发展，樟树良种苗木市场巨大。 

以往樟树苗木培育技术主要有二种，一是种子培育，即在樟子种子成熟期，从樟树上采摘果实，把果实经地过去皮处理，得到种子，然后通过对种子适当的处理进步播种催芽培育苗木；其二是扦插繁育，即从樟树上采摘半木质化的穗条，用激素处理穗条后，把穗条插入适当的基质中培育苗木。 

樟树苗木的培育主要依靠种子繁育实生苗。但种子繁育苗木存在如下缺点，一是种子育苗季节性强，一年一茬，种子保存时间不长，半年之后发芽率大幅下降；二是经科学选育的良种一般种子都很少，难以满足生产应用的需求，而营建种子园投资大，周期长；三是种子培育苗木不能培育无性系，生产上林份分化大，林相参差不齐，对经过选择表现优良的单株，无法实现规模利用。 

樟树扦插繁育的缺点是，一是老树穗条成活率低，因此需要营建扦插用的采穗圃，经过修剪矮化，培育合适的冠形，多产穗条。采穗圃需要精细化管理，必须投入大量的人工，在劳动力成本日渐高涨的今日，采穗圃管理成本难以承受；二是采穗母株容易老化，使用周期不长，3-5年后即要淘汰；三是扦插成活率受天气、管理、基质、生根素等诸多因素的影响，往往成活率难以保证；四是苗木价格偏高，市场难以接受。 

樟树是目前我国以南方地区的主要造林树种和园林绿化树种，每年苗木用量约数亿株，樟树种苗基本上是采用种子繁育实生苗，少量扦插繁育的扦插苗。近几年随着樟树良种选育的深入，所选育出来的的良种受到种子和插穗数量的限制，良种的推广应用遭遇瓶劲。樟树无性系组培繁育技术的攻克，使得大樟树良种的大规模使用成为现实。 

但是研究人员发现樟树在组织培养中存在以下几方面的问题：一是组培芽增殖时，褐化现象严重，芽尖坏死，甚至枯褐而死，有效增殖率低；二是组培生根诱导时，生根苗生长不整齐，生根苗培养周期长；三是组培苗移栽成活率低，苗期培育周期长，所以研究樟树无性系组培繁育的新技术有非常重要的意义。 

发明内容

本发明的目的是克服现有种子繁育和扦插繁育技术的不足，提供一种樟树无性系组培繁育方法，该方法克服了樟树种子繁育受季节影响、种子发芽率低，繁殖速率慢的缺点，同时克服了扦插苗繁育的缺点，实现了樟树良种大规模繁育。 

为实现上述发明的目的，本发明采取的技术方案如下： 

樟树无性系组培繁育方法，包括如下步骤：

（1）外植体材料的消毒：取当年生嫩梢去掉叶片，切段，使每段为带有1~2个腋芽的茎段，茎段先用0.2%灭菌净消毒10～20min，无菌水清洗6次，再用0.1%升汞，2～5滴吐温80，处理3～5min，无菌水清洗6次，消毒后备用；消毒成功率在80%以上(见表1)。

表1　外植体材料的消毒试验 

（2）芽的诱导：把步骤（1）经消毒的茎段，接种到芽的诱导培养基上，经过6～15d的培养，在腋芽处开始萌动，并长出新芽，所述的诱导培养基为DCR_改＋6-BA 0.3mg+NAA 0.05～0.5mg；芽的诱导率最高达75.3%(见表2)。

表2  不同培养基对外植体腋芽诱导的影响 

注：X₅和X₉为樟树的家系号