[发明专利]一种从赤非夹竹桃木中提取阿枯明的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药化学领域，涉及一种从赤非夹竹桃木中提取阿枯明的方法。

背景技术

阿枯明（Akuammine），又名阿枯胺，呈细针晶状，是一种吲哚类生物碱。分子式C₂₂H₂₆N₂O₄，分子量为382.46。在植物中广泛存在，主要存在于夹竹桃科植物中，如Picralima klaineana的种子、Picralima nitida(Stapf)Th&H.Durand种子、鸭脚树Tonduzia pittieri茎皮、漫长春花Vinca major C.V.Variegata叶中。药理研究表明，阿枯明具有广泛的生理活性。阿枯明具有局麻作用，强度可与可卡因相当，并且具有抗疟作用，对恶性疟原虫D6（氯喹敏感株）和W2（耐氯喹株）的ED₅₀分别为530ng/ml和1110ng/ml，另外，阿枯明还具有拟5-羟色胺活性。

目前国内外尚未见制备阿枯明的方法报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效快速、从赤非夹竹桃木中提取阿枯明的方法。

为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种从赤非夹竹桃木中提取阿枯明的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）将赤非夹竹桃木种子破碎后，用4-6倍量的酸醇回流提取2-3次，合并提取液，浓缩得到浓缩液；

（2）将浓缩液加于阳离子树脂柱上，先以水洗脱除杂，再用40-60%乙醇溶液洗脱，检查无生物碱为止，收集洗脱液，浓缩得总生物碱浸膏；

（3）将浸膏与氧化铝粉混合均匀上氧化铝柱，用不同配比的混合有机溶剂分段洗脱并分段收集，收集阿枯明高含量流分，合并后减压浓缩，得阿枯明半成品；

（4）将阿枯明粗品采用制备液相色谱分离纯化，得到阿枯明纯品。

步骤（1）中所述酸醇溶液为20%-80%的乙醇或甲醇溶液，盐酸调节醇溶液pH至2.2-4.7。

步骤（2）中所述阳离子树脂可以是大孔型或凝胶型强酸性阳离子交换树脂，树脂柱径高比为1:6-10。

步骤（2）中阳离子树脂柱的上柱液浓度为每ml相当于生药0.5-4g，上样速度为0.5-3BV/h，洗脱速度为3-5BV/h。

步骤（3）中所述氧化铝柱填料为中性或碱性氧化铝，粒度为100-400目，混合有机溶剂为氯仿-乙酸乙酯-甲醇，体积比为6:3:1~1:3:6，或石油醚-乙酸乙酯，体积比为15:1-1:1，或石油醚-丙酮，体积比为50:1-1:1，分段收集半成品。

步骤（4）中所述制备液相填料为C18，流动相为甲醇-水或乙腈-水，所述流动相中甲醇的体积百分比为60-90%，所述流动相中乙腈的体积百分比为40-65%。

本发明的有益效果是：本发明步骤少、得率高、操作简便，易于工业化生；离子交换树脂结合高效制备液相色谱用于阿枯明的分离纯化也属首次，本发明为阿枯明的进一步开发利用提供了药理原料、理论和实践支持。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

    取1kg赤非夹竹桃木种子破碎，用5LpH3.3的50%乙醇溶液加热回流提取2次，过滤，合并提取液，浓缩至1500ml，离心，上清液以2BV/h加入阳离子交换树脂柱（柱径高比为1:7），先用去离子水洗至流出液无颜色，再用50%乙醇溶液洗脱，检查无生物碱为止，收集洗脱液，浓缩得总生物碱浸膏。将总生物碱浸膏与5倍量的碱性氧化铝混合均匀，55℃以下烘干，加于填充好的中压碱性氧化铝柱，用氯仿-乙酸乙酯-甲醇按体积比6:3:1~1:3:6洗脱，分段收集，合并阿枯明流分，浓缩干燥后甲醇溶解，经高效制备液相色谱分离，柱填料为C18，流动相为乙腈-水（47:53），检测波长为242nm，紫外检测器在线监测，针对性收集阿枯明的制备流分溶液，减压回收试剂得4.9g阿枯明晶体，含量96.5%。

实施例2：