[发明专利]一种戈舍瑞林的纯化方法有效
申请号: | 201210353908.1 | 申请日: | 2012-09-21 |
公开(公告)号: | CN102863517A | 公开(公告)日: | 2013-01-09 |
发明(设计)人: | 赵忠卫;潘俊锋;马亚平;袁建成 | 申请(专利权)人: | 深圳翰宇药业股份有限公司 |
主分类号: | C07K7/23 | 分类号: | C07K7/23;C07K1/20 |
代理公司: | 深圳市科吉华烽知识产权事务所(普通合伙) 44248 | 代理人: | 韩英杰;张立娟 |
地址: | 518000 广东省深圳市南山区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 戈舍瑞林 纯化 方法 | ||
1.一种戈舍瑞林的纯化方法,包括以下步骤:
步骤1):以体积比5%—20%的醋酸和体积比15%—40%的甲醇的水溶液按照50g/L—100g/L的浓度溶解粗肽,得粗肽溶液;
步骤2):以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,将粗肽溶液进样,以体积比浓度为0.1%—0.8%和pH值为4.0—7.5盐的水溶液为A 相,乙腈为B相,体积比浓度B%为10%—50%,进行梯度洗脱,得戈舍瑞林;
步骤3)采用反相高效液相色谱法将戈舍瑞林的非醋酸盐转成醋酸盐。
2.根据权利要求1所述一种戈舍瑞林的纯化方法,其特征在于:所述体积浓度为0.1%—0.8%和pH值为4.0—7.5盐的水溶液是指体积比浓度为0.1%—0.8%酸的水溶液用碱的水溶液调节pH值为4.0—7.5得到的水溶液。
3.根据权利要求2所述一种戈舍瑞林的纯化方法,其特征在于:酸指磷酸、硫酸、醋酸或高氯酸中的一种或两种以上的混合;碱是指氢氧化钠、氨水或三乙胺。
4.根据权利要求1至3任意一项所述一种戈舍瑞林的纯化方法,其特征在于:所述步骤2)中,体积比浓度B%为20%—40%。
5.根据权利要求1至3任意一项所述一种戈舍瑞林的纯化方法,其特征在于:所述步骤3)是指以八烷基硅烷键合硅胶固定相,用含体积比浓度3%—10%乙腈的醋酸铵水溶液冲洗15min—30min,醋酸铵水溶液中醋酸铵的体积比浓度为0.1%—0.8%,pH值为6.0—6.5;然后用醋酸水溶液—乙腈体系洗脱,收集戈舍瑞林溶液,醋酸水溶液中醋酸的体积比浓度为0.05%—0.2%;洗脱步骤所采用的乙腈体积比浓度为20%—60%。
6.根据权利要求4所述一种戈舍瑞林的纯化方法,其特征在于:所述步骤3)是指以八烷基硅烷键合硅胶固定相,用含体积比浓度3%—10%乙腈的醋酸铵水溶液冲洗15min—30min,醋酸铵水溶液中醋酸铵的体积比浓度为0.1%—0.8%,pH值为6.0—6.5;然后用醋酸水溶液—乙腈体系洗脱,收集戈舍瑞林溶液,醋酸水溶液中醋酸的体积比浓度为0.05%—0.2%;洗脱步骤所采用醋酸水溶液—乙腈体系中乙腈的体积比浓度为20%—60%。
7.根据权利要求5所述一种戈舍瑞林的纯化方法,其特征在于:所述醋酸铵水溶液中醋酸铵的体积比浓度为0.3%。
8.根据权利要求5所述一种戈舍瑞林的纯化方法,其特征在于:醋酸水溶液中醋酸的体积比浓度为0.1%。
9.根据权利要求5所述一种戈舍瑞林的纯化方法,其特征在于:洗脱步骤所采用醋酸水溶液—乙腈体系中乙腈的体积比浓度为40%。
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