[发明专利]一种治疗腰椎间盘突出的注射剂的制备方法及检测方法

权利要求书

1.一种治疗腰椎间盘突出的注射剂的制备方法，其特征在于，按重量份计算，取牛膝10～25份、杜仲5～10份、桑寄生20～35份和秦艽10～25份，加入60%～90%乙醇溶液，乙醇溶液的用量为6～8倍，渗漉提取，过滤，合并醇液，减压回收乙醇并浓缩成相对密度为1.1～1.5的浸膏；加2～3倍水加热到40～60℃搅拌溶解，加入有机溶剂进行萃取，回收溶剂，浓缩干燥得牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物和秦艽提取物；按重量份计算，取地龙10～15份，加水煎煮两次，每次加水6～9倍量，煎煮2～3.5小时，合并两次煎煮液浓缩成1.1～1.5的浸膏；将浸膏加90％～95％的乙醇，搅拌、沉淀回收乙醇并浓缩，在45～50℃下干澡、粉碎成粉，得地龙提取物；将牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物、秦艽提取物和地龙提取物混合并加入适当的辅料制备成冻干粉针剂或输液剂。

2.根据权利要求1所述的治疗腰椎间盘突出的注射剂的制备方法，其特征在于，按重量份计算，取牛膝18份、杜仲8份、桑寄生25份和秦艽18份，加入60%～90%乙醇溶液，乙醇溶液的用量为6～8倍，渗漉提取，过滤，合并醇液，减压回收乙醇并浓缩成相对密度为1.1～1.5的浸膏；加2～3倍水加热到40～60℃搅拌溶解，加入有机溶剂进行萃取，回收溶剂，浓缩干燥得牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物和秦艽提取物；按重量份计算，取地龙12份，加水煎煮两次，每次加水6～9倍量，煎煮2～3.5小时，合并两次煎煮液浓缩成1.1～1.5的浸膏；将浸膏加90％～95％的乙醇，搅拌、沉淀回收乙醇并浓缩，在45～50℃下干澡、粉碎成粉，得地龙提取物；将牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物、秦艽提取物和地龙提取物混合并加入适当的辅料制备成冻干粉针剂或输液剂。

3.根据权利要求1或2所述的治疗腰椎间盘突出的注射剂的制备方法，其特征在于，取牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物、秦艽提取物和地龙提取物各5g加入2000ml注射用水中搅拌均匀，加入适量10%柠檬酸钠溶液，搅拌至溶液完全溶解，调节pH值4.3～5，搅拌使之完全溶解，加入30ml聚乙二醇600、140g甘露醇，搅拌使之完全溶解，按照质量体积百分比加入0.05%的活性炭，65℃静止吸附20分钟后，过滤除碳，补加注射用水至全量，调节pH值4.3～5，精滤，中间体取样，检测合格后，取3ml灌装于西林瓶中，半压胶塞，装入冻干机，冷冻干燥，箱内压胶塞，出箱锁铝盖，包装即得冻干粉针剂。

4.根据权利要求1或2所述的治疗腰椎间盘突出的注射剂的制备方法，其特征在于，取牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物和秦艽提取物各500mg加入600ml注射用水中搅拌均匀，再加入1.2g柠檬酸钠和50ml丙二醇，搅匀，使之形成澄明溶液，再取300ml注射用水置配液器中，加入800mg酒石酸，再加入地龙提取物400mg，搅拌至形成澄明溶液，加入牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物和秦艽提取物溶液，再加注射用水至1000ml，测定pH值，用1%酒石酸或0.1MNaOH溶液调pH至4.5～5.3，加入45g葡萄糖，搅拌溶解，加入0.05%的活性炭煮沸，搅拌保温20分钟，过滤，三级微孔滤膜：按先后次序为：0.8um-0.45um-0.22um，过滤，加入注射用水稀释，灌封，110℃灭菌1小时，即得葡萄糖输液剂。

5.根据权利要求1或2所述的治疗腰椎间盘突出的注射剂的制备方法，其特征在于，取牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物和秦艽提取物各500mg加入600ml注射用水中搅拌均匀，再加入1.2g柠檬酸钠和50ml丙二醇，搅匀，使之形成澄明溶液，再取300ml注射用水置配液器中，加入800mg酒石酸，再加入地龙提取物400mg，搅拌至形成澄明溶液，加入牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物和秦艽提取物溶液，再加注射用水至1000ml，测定pH值，用1%酒石酸或0.1MNaOH溶液调pH至4.5～5.3，加入70g氯化钠，搅拌溶解，加入0.05%的活性炭煮沸，搅拌保温20分钟，过滤，三级微孔滤膜：按先后次序为：0.8um-0.45um-0.22um，过滤，加入注射用水稀释，灌封，110℃灭菌1小时，即得氯化钠输液剂。

6.权利要求1～5任一所述的治疗腰椎间盘突出的药物制剂的检测方法，其特征在于，包括：

（1）鉴别

（A）取本品或内容物适量研成细粉，取4g，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加0.0lmol／L的氢氧化钠溶液20ml，微热使溶解，置分液漏斗中，加乙醚10ml，振摇提取，弃去乙醚液，水层再用醋酸乙酯10ml，振摇提取，醋酸乙酯提取液浓缩至约lml；作为供试品溶液，水层备用；或者直接取输液剂1ml作为供试品溶液。另取紫茎牛膝甾酮对照品制成对照品溶液；照薄层色谱法，附录VI B试验，吸取上述两种溶液各10～15ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿：甲酸=5：l为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(B)取备用的水层，加水饱和的正丁醇15ml，振摇提取，分取正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水5ml洗涤，弃去水层液，正丁醇提取液置水浴上蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取蚯蚓解热碱对照品适量，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法，附录VI B试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿：甲酸：水=7：3：0．5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

（C）取本品适量研成细粉，取10g，加75％乙醇l00ml，摇匀，加盐酸10ml，置水浴中加热回流3小时，取出，放冷，用60～90℃的石油醚振摇提取4次，每次需要的溶剂量为30ml，20ml，15ml，15ml，合并石油醚提取液，挥干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取秦艽对照药材，同样的方法制成对照药材溶液；照薄层色谱法，附录VI B试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷：醋酸乙酯=4：l为展开剂，二次展开，每次展距18cm，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热使斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。

（2）含量测定

照高效液相色谱法，《中国药典》2000一部附录VID测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇：水=55：45为流动相，用蒸发光散射检测器检测，理论塔板数按紫茎牛膝甾酮计算不低于2000；精密称取经105℃干燥至恒重的紫茎牛膝甾酮对照品适量，加甲醇制成每lml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液；取本品或内容物适量研成细粉，取2.0g，精密称定，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，用甲醇20m1分次洗涤残渣和容器，洗液并入滤液中；将提取液回收甲醇至干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次15ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次15ml；取正丁醇液，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，离心，即得供试品溶液；分别精密吸取上述对照品溶液5ul、10ul，供试品溶液5～10ul，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算含量。