[发明专利]一种蛇龙珠葡萄品种葡萄病毒病的脱除与苗木快繁方法

说明书

技术领域

本发明属于葡萄种植领域，尤其是涉及一种蛇龙珠葡萄品种的病毒脱除种植方法。

背景技术

蛇龙珠是我国酿造红葡萄酒的优良品种之一，与赤霞珠、品丽珠并称为“三珠”，在我国主要分布在胶东半岛沙（砂）地葡萄园和宁夏产区。以其原料酿造的单品种酒酒质好，呈宝石红色、果香浓，酒体丰满圆润，典型性强，无论是山东胶东半岛还是西北的宁夏贺兰山东麓地区，以蛇龙珠为原料酿制的单品种酒均表现出独特优良品质，是我国最具发展潜力的酿酒葡萄品种之一。张裕公司和宁夏西夏王葡萄酒业有限公司生产的蛇龙珠干红葡萄酒曾获得国际大奖，得到了消费者认可，也取得了较好的口碑和经济效益，一些国际同行对中国西部生产的蛇龙珠葡萄酒也给予了一定的赞誉。

蛇龙珠葡萄品种具有较强的抗旱性、抗瘠薄性，其根系较发达，生长力旺盛，种植在较瘠薄的土壤上产量高、质量好，而种植在肥沃的土壤上，常表现为旺长结果量少，同时该品种进入结果期晚、产量低、树势难控制。蛇龙珠品对病毒病抵抗力低，尤其是扇叶病毒、卷叶病毒和蕃茄环斑病毒，蛇龙珠葡萄品种感染此几类病毒非常广泛严重，20世纪80年代中期，王朝公司自山东引种蛇龙珠在蓟县建立基地，并作为酿造干红葡萄酒的主要原料，但是由于病毒病严重，至90年代初，基地大部分蛇龙珠葡萄植株由于感染卷叶病毒，树势衰弱，并逐渐死亡。1996年，宁夏银广夏葡萄酿酒公司自山东引种的上千亩蛇龙珠也因卷叶病毒病而遭受损失；因此病毒病是限制该品种发展的一大障碍。因此在天津等华北地区引入蛇龙珠葡萄品种的种植需要建立严格科学的管理种植方法，尤其是需要找出针对性的病毒脱除解决方法，才能获得较高的产量和质量。

发明内容

针对上述的不足，经过多年实践调查和研究、生产中初步应用，本发明人发明了一种病毒脱除方法，这种方法是解决蛇龙珠品种栽培技术上存在问题的根本措施，能有效快速脱除病毒，提高蛇龙珠葡萄品种的成活率。

一种蛇龙珠葡萄品种葡萄病毒病的脱除与苗木快繁方法，包括营养系初选、试管苗茎尖培养、热处理脱毒、试管苗移栽驯化、病毒检测、无病毒苗木快繁步骤，其中：

1）营养系初选步骤：

春季在蛇龙珠酿酒葡萄品种园选择无明显扇叶病毒症状的植株，作好标记，在此基础上于当年秋季选择结果性状良好、无明显或无卷叶病毒症状的植株，并作好标记；

2）试管苗茎尖培养步骤：

先于转年春季五月份，在葡萄品种园中剪取做好标记的各植株健康嫩梢上部，去掉叶片，剪成单芽茎段，用自来水冲洗2－3小时，备用；

在超净工作台上，将上述备用单芽茎段用70％的酒精浸洗振荡10秒钟后，用0.1%升汞加一滴吐温，摇动5－10分钟后，用无菌水冲洗4-5次，剪除两端接触药液部分，剪成1－2厘米单芽芽段，插于培养基上，进行培养，得到试管组培苗；

3）热处理脱毒步骤：

在超净工作台无菌条件下，将上述试管组培苗茎尖剪下0.1--0.5cm，接种到培养基上，进行培养，成苗后继代培养，扩大繁殖待其生根；生根后，将其直接置于培养箱中，温度最初为25℃，以后用一个星期时间逐渐升温至37±1℃，并在该条件下培养1个月；

4）试管苗移栽驯化步骤：

取上述热处理后的试管苗的茎尖，0.3--0.5cm左右，进行组织培养，培养温度为25±2℃，待培养瓶中的试管苗长至6－7cm时，在培养室或温室中将瓶口打开，敞口锻炼2-3天后，去掉培养基，用20－25℃的水冲洗掉琼脂，栽入盛有蛭石的周转箱中，并用玻璃板或塑料薄膜盖好，保持其内小气候，湿度100％，温度25℃，每天喷水一次，并通风1.5--2小时，3天后可开一小缝隙放风，以后逐渐将缝隙加大，直至全部揭开，每周喷一次营养液，驯化10天后，将其移入培养钵中培养成苗；

5）病毒检测

将营养钵中生长的葡萄苗的叶子取下，进行病毒检测，检测苗木是否带有葡萄病毒病；其中主要检测检测苗木是否带有葡萄扇叶病毒、卷叶病毒和蕃茄环斑病毒。

6）无病毒苗木快繁

将上述检测无病毒的葡萄苗采用培养基进行上述步骤中组培、扩大繁殖及移载驯化，形成无病毒苗木的快速繁殖。

其中上述步骤中所使用的培养基为：B₅+0.2ppmIAA+0.01ppm 6-BA培养基，培养基的厚度为2.3--2.5cm。