[发明专利]一种人体液HSP70胶体金标检测试纸条及其制备方法

权利要求书

1.一种人体液HSP70胶体金标检测试纸条，其特征在于：此试纸条由设在固定板（1）上依次相连的样品垫（2）、金标垫（3）、硝酸纤维素膜（4）和吸水纸（9）组成；在硝酸纤维素膜（4）上设有第一检测线（5）、第二检测线（6）和第三检测线（7）和一条质控线（8）；在金标垫（3）上设有金标抗体。

2.根据权利要求1所述的人体液HSP70胶体金标检测试纸条，其特征在于：所述固定板（1）为具有压敏胶的PVC板，样品垫（2）为玻璃纤维膜，金标垫（3）为聚酯纤维膜。

3.根据权利要求1所述的人体液HSp70胶体金标检测试纸条，其特征在于：所述金标抗体为显色抗体，所述检测线为捕捉抗体，显色抗体与捕捉抗体为1对双抗体夹心配对的鼠抗人HSP70单克隆抗体。

4.根据权利要求1所述的人体液HSP70胶体金标检测试纸条，其特征在于：所述金标抗体用粒径为20nm-60nm的胶体金颗粒标记。

5.根据权利要求1所述的人体液HSP70胶体金标检测试纸条，其特征在于：所述质控线（8）为羊抗鼠IgG。

6.权利要求1所述人体液HSP70胶体金标检测试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）用常规的柠檬酸三钠还原法制备均匀粒径为20nm-60nm的胶体金；

（2）调节上述胶体金pH为8.5-10，然后加入显色抗体与其反应，其中显色抗体的浓度为0.04mg/ml，离心得沉淀，重悬沉淀，得金标抗体溶液，将金标抗体溶液用喷墨仪喷印在聚酯纤维膜，晾干；

（3）将捕捉抗体用抗体稀释液稀释成浓度为1mg/ml的捕捉抗体溶液，用喷墨仪将捕捉抗体溶液在硝酸纤维素膜上喷划三条平行检测线，真空干燥； 

（4）将羊抗鼠IgG用抗体稀释液稀释成浓度为0.5mg/ml的羊抗鼠IgG溶液，用喷膜仪将抗体喷线在硝酸纤维素膜上形成质控线，真空干燥；

（5）按样品垫、金标垫、硝酸纤维膜、吸水纸顺序粘贴在固定板上，切条，装入塑料袋，干燥包装。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，离心的方法为：反应液于5000xg离心30min，沉淀用1wt%牛血清白蛋白溶液重悬浮，反复2次；其中1 wt %牛血清白蛋白溶液为10mM 的Tris-HCl 缓冲溶液，pH为8.5，含1wt%的牛血清白蛋白。

8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）中重悬沉淀的溶液为：20mM 的Tris-HCl缓冲溶液，pH为8.5，其中含30wt%的海藻糖，1wt% 的牛血清白蛋白，1wt %的酪蛋白，体积浓度为0.01%的 Tween-20，0.02 wt % 的NaN3。

9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述抗体稀释液为10mM 的磷酸盐缓冲溶液，pH为7.6，其中含10wt%的海藻糖，体积浓度为3%的甲醇。