[发明专利]一种血液同型半胱氨酸的检测方法及试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种血液同型半胱氨酸的检测方法及试剂盒。

背景技术

近十多年的研究证实，血液中高浓度的同型半胱氨酸(Homocysteine，HCY)是冠状动脉疾病、脑血管及外周血管疾病的独立危险因素。HCY是由蛋氨酸去甲基生成的一种含硫氨基酸,它在体内主要通过再甲基化、转硫作用两种途径进行代谢：其一，在蛋氨酸合成酶的催化作用下，以维生素B12为辅酶，以N5-甲基四氢叶酸为甲基供体，HCY被甲基化生成蛋氨酸。此过程的关键酶是以维生素B2为辅酶的亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)，该酶使N5，N10-亚甲基四氢叶酸还原为N5-甲基四氢叶酸，其作用非常重要；其二，HCY与丝氨酸结合，在胱硫醚-β-合成酶(CBS)催化作用下，以维生素B6为辅酶，生成胱硫醚，后者再裂解为半胱氨酸和α-酮丁酸，参与代谢，形成转硫化途径。

当上述代谢途径受阻时，HCY在细胞内蓄积，并进入血液循环，引起慢性病理损害。参与HCY代谢的酶(如MTHFR和CBS)如有遗传缺陷可导致严重的高HCY血症，而由于营养因素导致的维生素B6、B12和叶酸的缺乏同样可产生高HCY血症。

除遗传、营养因素外，年龄、种族、生活习惯(如吸烟、饮酒、高蛋氨酸食物等)、药物和某些疾病因素等也可以不同程度地影响血浆HCY水平。

血浆中约75%的HCY与白蛋白结合，形成结合型HCY，其余的则主要以二硫键结合的HCY-HCY、HCY-半胱氨酸化合物形式存在，游离型只有1～2%以还原型HCY存在于血浆中。通常测定的是血浆中所有形式HCY总和，即总HCY(total Homocysteine，tHCY)。

一般认为，血浆tHCY正常值参考范围为5～15μmol/L(高效液相色谱法)，当血浆tHCY≥15μmol/L时，即为高HCY血症(Hyperhomocysteinemia，HHcy);当血浆tHcy>40μmol/L时即超出肾阈值，可出现同型半胱氨酸尿，这种情况主要见于遗传病。研究发现，男性血浆tHCY浓度介于9.0～14.9μmol/L者，其患冠心病的危险性是低于9.0μmol/L者的2倍，而高于14.9μmol/L者，其危险性则增加6倍，因此，1995年建议理想的血浆tHcy浓度应低于10μmol/L

2006年，美国高血压协会(ASH)和脑卒中协会(ASA)发布了对于缺血性脑卒中和短暂脑缺血发作患者的卒中预防指南。在该指南里，高Hcy血症被列为脑卒中的重要风险因子之一，并定义Hcy>10μmol/L即为高Hcy血症，建议给予患者补充维生素B6、B12和叶酸。