[发明专利]一种合成利那洛肽的方法

权利要求书

1.一种合成利那洛肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、固相合成在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列N端、Thr侧链上、Cys侧链上、Asn侧链上、Tyr侧链上、Glu侧链上偶联有保护基以及在C端偶联有树脂固相载体的利那洛肽树脂，所述Cys侧链上偶联的保护基为Mmt保护基；

步骤2、利那洛肽树脂裂解脱除所有保护基和树脂固相载体得到利那洛肽线性粗肽，然后采用GSH/GSSH氧化体系对利那洛肽线性粗肽进行氧化反应，按照其N端到C端的氨基酸顺序，形成第1位Cys和第6位Cys的二硫键、第2位Cys和第10位Cys的二硫键以及第5位Cys和第13位Cys的二硫键得到利那洛肽粗品，纯化后即得利那洛肽。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤1具体为：

在活化体系存在下，将N端偶联有Fmoc保护基以及侧链偶联有tBu保护基的Tyr（Fmoc-Tyr（tBu）-OH）与树脂固相载体偶联后脱Fmoc保护基得到H-Tyr（tBu）-树脂固相载体，然后按照SEQ ID NO:1所示氨基酸序列C端到N端的顺序，依次逐个将N端偶联有Fmoc保护基以及侧链偶联有Mmt保护基的Cys（Fmoc-Cys（Mmt）-OH）、N端偶联有Fmoc保护基的Gly（Fmoc-Gly-OH）、N端偶联有Fmoc保护基以及侧链偶联有tBu保护基的Thr（Fmoc-Thr（tBu）-OH）、N端偶联有Fmoc保护基以及侧链偶联有Mmt保护基的Cys（Fmoc-Cys（Mmt）-OH）、N端偶联有Fmoc保护基的Ala（Fmoc-Ala-OH）、N端偶联有Fmoc保护基的Pro（Fmoc-Pro-OH）、N端偶联有Fmoc保护基以及侧链偶联有Trt保护基的Asn（Fmoc-Asn（Trt）-OH）、两个N端偶联有Fmoc保护基以及侧链偶联有Mmt保护基的Cys（Fmoc-Cys（Mmt）-OH）、N端偶联有Fmoc保护基以及侧链偶联有tBu保护基的Tyr（Fmoc-Tyr（tBu）-OH）、N端偶联有Fmoc保护基以及侧链偶联有OtBu保护基的Glu（Fmoc-Glu（OtBu）-OH）、两个N端偶联有Fmoc保护基以及侧链偶联有Mmt保护基的Cys（Fmoc-Cys（Mmt）-OH）进行延伸偶联，偶联完后脱除Fmoc保护基，得到利那洛肽树脂（H-Cys（Mmt）-Cys（Mmt）-Glu（OtBu）-Tyr（tBu）-Cys（Mmt）-Cys（Mmt）-Asn（Trt）-Pro-Ala-Cys（Mmt）-Thr（tBu）-Gly-Cys（Mmt）-Tyr（tBu）-树脂固相载体）。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述H-Tyr（tBu）-树脂固相载体替代度为0.4-0.62mmol/g。

4.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述活化体系为HOBt/DMAP/DIPCDI三体系活化体系或HOBt/DIPCDI双体系活化体系。

5.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述活化体系采用DMF、DCM、NMP和DMSO中任意一种或两种溶解。

6.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述树脂固相载体为王树脂。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤2所述GSH/GSSH氧化体系中GSH和GSSH的摩尔比为5:1-15:1。

8.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤2所述氧化反应的pH值为7.8-8.0。

9.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤2所述氧化反应的温度为0-30℃。

10.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤2所述裂解采用由体积百分比为90-95%的TFA、2-4%的TIS和余量水组成的裂解液裂解。