[发明专利]硫酸头孢匹罗/氯化钠注射液中的头孢匹罗有关物质Ⅱ的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于医药质量检测领域，具体涉及一种硫酸头孢匹罗/氯化钠注射液非PVC即配型输液中的头孢匹罗有关物质Ⅱ的检测方法。

背景技术

目前，专利文献专利号200520115059公开了一种硫酸头孢匹罗双室输液袋包装，但说明书中并未记载有相关的检测方法。

而且，中国国家食品药品监督管理局颁布了硫酸头孢匹罗/氯化钠注射液标准（试行）（YBH17062005），这也是本发明人所提出的硫酸头孢匹罗/氯化钠注射液非PVC即配型输液的检测参照的标准。

其中，头孢匹罗的有关物质Ⅱ（聚合物）对于输液剂型是非常重要的、不能缺少的检测项目，也是众多研发机构研究的重要课题。但是在中国国家食品药品监督管理局的硫酸头孢匹罗/氯化钠注射液标准（试行）（YBH17062005）中有关头孢匹罗聚合物的测定方法存在以下的问题。

作为其测定条件参数，使用色谱柱：用葡聚糖凝胶G-10（40-120μm）为填充剂；以pH7.0的0.01mol/L磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠2.19g和磷酸二氢钠0.54g加水1000ml溶解，调节pH至7.0）为流动相A，流速为2ml/min；0.2%十二烷基硫酸钠、0.8NaCl以及0.01%硫酸盐缓冲液的混合液用硫酸调PH为1.5为流动相B，流速为2.5ml/min；检测波长：254nm。

所述测定方法的缺点在于：G-10色谱柱灵敏度低，分离度差，不能达到基线分离，采样时间过长，无法准确检测头孢匹罗聚合物，不能达到检测目的，不能提供正确、准确、可靠的检测方法，不能为保证产品质量合格提供指导方法。

发明内容

本发明提供了一种硫酸头孢匹罗/氯化钠注射液非PVC即配型输液的头孢匹罗有关物质Ⅱ的检测方法，采用高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography/HPLC），以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

本发明为一种硫酸头孢匹罗/氯化钠注射液中的头孢匹罗有关物质Ⅱ的检测方法，采用高效液相色谱法，进行色谱条件与系统适用性的试验，将适合分离分子量为1000-5000球状蛋白的色谱用亲水硅胶作为填充剂，以体积比85：15的磷酸盐缓冲液-乙腈为流动相，流速为0.5ml/min，其中所述磷酸盐缓冲液由体积比50：50的0.05mol/L磷酸氢二钠与0.05mol/L磷酸二氢钠构成，检测波长为254nm，从输液袋中取相当于头孢匹罗10mg的适量硫酸头孢匹罗/碳酸钠混合粉末，置于10ml量瓶中；加水溶解并稀释至刻度，摇匀；取20μl注入液相色谱仪中，头孢匹罗峰与其前面的杂质峰之间的分离度应符合规定。

优选为，取输液袋中相当于头孢匹罗10mg的适量硫酸头孢匹罗/碳酸钠混合粉末，称定（称取重量精确至所取重量的千分之一），加水溶解并制成每1ml中含头孢匹罗1.0mg的溶液，作为供试品溶液（临用新配）；另取硫酸头孢匹罗对照品适量，称定，加水溶解并稀释成每1ml中含头孢匹罗5μg的溶液，作为对照品溶液；量取供试品溶液与对照品溶液各20μl，注入液相色谱仪中，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20%～25%，进行检测，记录色谱图；按外标法以峰面积计算保留时间小于头孢匹罗的杂质总量，以头孢匹罗计，不得超过1.5%，即，输液袋中的硫酸头孢匹罗/碳酸钠的杂质总量不得超过硫酸头孢匹罗/碳酸钠自身的1.5%。

发明的效果

本发明的检测方法采用以球状蛋白色谱用的亲水硅胶作为充填剂的色谱柱进行分析测定，先进可靠，准确度高，专属性强，作为质量控制方法具有良好的精密度、重现性、稳定性，能够有效地检测出硫酸头孢匹罗/氯化钠注射液非PVC即配型输液产品中的头孢匹罗有关物质Ⅱ聚合物，能够用于质量控制。

本发明作为申报质量标准经权威机构中国北京市药品检验所检测，证实其具有可操作性、检测方法先进、准确率高、具有良好的精密度、重现性、稳定性。

附图说明

图1表示本发明一实施例为硫酸头孢匹罗/氯化钠注射液中的头孢匹罗有关物质Ⅱ的检测方法中，以磷酸盐缓冲液为流动相的液相色谱测试图。

图2表示本发明另一实施例所述的头孢匹罗有关物质Ⅱ的检测方法中，以磷酸盐缓冲液－乙腈（体积比90：10）为流动相的液相色谱测试图。