[发明专利]双键取代雷公藤内酯衍生物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物活性成分的结构改造及活性研究，具体涉及双键取代雷公藤内酯衍生物及制备方法和治疗增生性肿瘤疾病的研究。

背景技术

雷公藤，俗名断肠草，系卫矛科(Celastraceae)雷公藤属木质藤本植物,是我国具有的资源比较丰富的一种植物。雷公藤属(Tripterygium)植物有四种，即雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook f.)、昆明山海棠(Tripterygium hypoglaucum Levl.Hutch)、东北雷公藤(黑蔓)(Tripterygium regelii Sprague et Takeda)和苍山雷公藤(Tripterygium forretii Dicls)，在我国均有分布。雷公藤最早收载于《神农本草经》，其主要化学成分有二萜、三萜、倍半萜、生物碱等，至今已从雷公藤属植物中分离出化合物近200种。近二十年来的研究表明它具有抗肿瘤、抗炎、免疫抑制、抗生育、抗菌等多种活性。

雷公藤植物在民间用于治疗肿瘤已有多年历史，其中活性成分之一是雷公藤内酯醇。雷公藤内酯醇除了已得到广泛的抗肿瘤作用研究外，还曾经进入临床试验，用于治疗白血病，但雷公藤内酯醇较大的毒副作用，过于狭窄的治疗窗口，限制了其在临床中应用。以往对雷公藤内酯醇的结构改造大多局限在水溶性基团的引进上，主体结构上并无根本性改动。当这类前药进入体内后，通过水解或代谢后仍然转变为雷公藤内酯醇在体内发挥药效作用，这就决定了它们不可能从根本上改善雷公藤内酯醇的毒副作用。同时在对雷公藤内酯醇C₁₄-位进行改造时发现，该位置的基团构型对于化合物活性的影响十分显著，光学异构体的问题给合成及分离工作增加了很大的难度。

本发明的重点在于对雷公藤内酯醇构效关系的研究，对其结构进行了不同于现有技术的改造和修饰，获得了一批新型结构的雷公藤内酯衍生物，从而完成了本发明。

发明内容

本发明所要解决的技术问题之一在于针对现有雷公藤内酯醇所存在的问题而在雷公藤内酯醇C₅-位或C₁₅-位引入羟基，C₁₄-位引入环外双键，形成一批双键取代雷公藤内酯衍生物。

本发明所要解决的技术问题之二在于提供一种以14-双键雷公藤内酯为基本结构的羟基取代雷公藤内酯衍生物的制备方法。

本发明所要解决的技术问题之三在于通过以14-双键雷公藤内酯为基本结构的羟基取代雷公藤内酯衍生物的药理毒理实验研究，发现其对于肿瘤疾病，尤其是生殖系统的肿瘤具有良好的治疗作用，具有高效、低毒，与传统细胞毒抗肿瘤药物无交叉抗药性的特点，具有很好的用于治疗肿瘤等增生性疾病的开发前景。

本发明提供的双键取代雷公藤内酯衍生物为通式（Ⅰ）所示化合物或其药学上可接受的盐或水合物或它们的光学异构体：

其中，R₁=OH，R₂=H，或者R₁=H，R₂=OH。

在本发明的一个优选实施例中，通式（Ⅰ）中R₁=OH，R₂=H，即如下结构式（Ⅰa）所示化合物：

在本发明的一个优选实施例中，通式（Ⅰ）中R₁=H，R₂=OH，即如下结构式（Ⅰb）所示化合物：

本发明的制备方法如下：

1、结构式（Ⅰa）所示化合物的制备方法，由以下步骤组成：

步骤1：以雷公藤内酯酮（1）为起始物，在非质子性溶剂中，利用碘甲烷格式试剂进攻雷公藤内酯酮的C14位羰基得到（14S）-14β-甲基表雷公藤内酯醇（2）；

步骤2：（14S）-14β-甲基表雷公藤内酯醇（2）在非质子性溶剂中用三氟乙酸酐脱水得到C14位环外双键产物14-脱羟基-14-亚甲基雷公藤内酯醇（3）；

步骤3：14-脱羟基-14-亚甲基雷公藤内酯醇（3）在含有粗糙链孢霉的土豆培养基中培养制备得到14-脱羟基-14-亚甲基-5-羟基雷公藤内酯醇（Ⅰa）

2、结构式（Ⅰb）所示化合物的制备方法，由以下步骤组成：

步骤1：14-脱羟基-14-亚甲基雷公藤内酯醇（3）在磷酸缓冲溶液中使用大鼠肝微粒体蛋白孵育制备得到14-脱羟基-14-亚甲基-15-羟基雷公藤内酯醇（Ⅰb）