[发明专利]抑制肿瘤转移的方法和试剂

说明书

技术领域

本发明属于生物制药领域；更具体地，本发明涉及抑制肿瘤转移的方法和试剂。

背景技术

乳腺癌是女性高发的全球性恶性肿瘤，致死率居高不下。恶性肿瘤有两大特性：1.无限增殖能力；2.原发肿瘤转移至体内其它脏器。乳腺癌的致死率90%是由转移灶引起的。乳腺癌细胞可以转移的身体各个脏器，诸如大股、肺脏、脑等，因此，研究探索以及阐明其转移机制，进而为临床治疗上提供理论依据非常重要。但是现在关于这方面的知识依然比较贫乏。因为转移是实体瘤发展过程中很晚期的一个环节，并且过程非常复杂，包括癌细胞从原发瘤中逃逸，进入循环系统，到达远端组织，着床，而后增殖为次发肿瘤。

Bcl-3(B cell lymphoma-3)是一个原癌基因，最早在一类B淋巴细胞白血病病人中发现。随后的分子结构分析发现，Bcl-3是NF-κB信号通路中IκB家族成员之一，但是Bcl-3与其他典型IκB家族成员不同，它不阻止NF-κB转录复合物入核行使功能，故属于非典型的IκB蛋白。目前对其功能的研究仍主要与转录因子NF-κB相关联。对于Bcl-3的分子功能报道现在主要集中于以下几个方面：(1)抑制NF-κB转录因子结合DNA；(2)作为辅助因子激活基因转录；(3)调节蛋白稳定性。

Bcl-3不仅能作为转录因子NF-κB的调节因子而且还参与蛋白稳定性的调节，所以能够在很多的生命过程中发挥作用。在免疫系统中，Bcl-3基因敲除小鼠更易患感染性疾病，这与其外周免疫器官发育不健全有关。敲除小鼠的生发中心缺失，在免疫刺激下DC细胞和B细胞的免疫应答减弱。另有报道，敲除Bcl-3基因能够影响T细胞的免疫应答，Bcl-3通过调控GATA-3的表达以调控Th2细胞的分化。此外，Bcl-3能够影响胸腺髓质区上皮细胞的发育，Bcl-3敲除后髓质区发育不良造成T细胞阴性选择缺陷而致自身免疫性疾病。在肿瘤发生中，已知Bcl-3高表达于各种类型的肿瘤中。最早Bcl-3在一种淋巴细胞白血病中通过异位到免疫球蛋白轻链基因α位点而高表达；此后在乳腺癌、子宫内膜癌、子宫颈癌及鼻咽癌中均检测到Bcl-3的表达增高。但这种高表达Bcl-3是如何发生的却是研究的难点生。

转化生长因子β(TGF-β)信号通路可以调控细胞增殖，分化和命运。在肿瘤发生早期，TGF-β通过保持细胞停在G1期而抑制细胞增殖，但在肿瘤晚期却可以促进细胞的迁移与转移，而乳腺癌细胞对该信号尤其敏感，这已经得到广泛的证实。一般认为TGF-β信号的活化需要Smad2/Smad3异二聚体的磷酸化，而后该二聚体与Smad4结合形成三聚体，入核行使转录因子的功能。但Liang等证明，Smad2与Smad3的调控乳腺癌细胞转移过程中可能有不同功能。即Smad3促转移而Smad2抑转移。因而研究Smad3的降解机制可能为临床治疗乳腺癌转移上提供理论支持。但是关于这方面的研究仍然很少。

迄今为止，关于Bcl-3是否调控肿瘤细胞的转移和迁移以及Bcl-3的细胞内信号调节机制，并没有报道。

发明内容

本发明的目的在于提供抑制肿瘤转移的方法和试剂。

在本发明的第一方面，提供一种Bcl-3的下调剂的用途，用于制备抑制肿瘤转移的组合物。

在一个优选例中，所述的肿瘤包括：乳腺癌、结肠癌。

在另一优选例中，所述的Bcl-3的下调剂选自：

核酸抑制物(如干扰分子)，蛋白抑制剂，蛋白水解酶，蛋白结合分子(如抗体或配体)，其能够在蛋白或基因水平上下调Bcl-3的表达或活性。

在另一优选例中，所述的Bcl-3的下调剂选自：

以Bcl-3基因或其转录本为靶序列、且能够抑制Bcl-3基因表达或基因转录的干扰分子，包括：shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸，或能表达或形成所述shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物；或

特异性与Bcl-3蛋白结合的结合分子(如能够抑制Bcl-3蛋白活性的抗体或配体)。

在另一优选例中，所述的Bcl-3的下调剂具有以下shRNA结构：

Seq_正向-X-Seq_反向；

其中，Seq_正向的核苷酸序列具有SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示；Seq_反向为与Seq_正向互补的序列；