[发明专利]超高压提取金银花中绿原酸和木犀草苷及液相分析方法无效
| 申请号： | 201210380404.9 | 申请日： | 2012-10-10 |
| 公开（公告）号： | CN103257187A | 公开（公告）日： | 2013-08-21 |
| 发明（设计）人： | 李贺然;胡文;李永霞;刘顺;郝杰;王炳义 | 申请（专利权）人： | 苏州大学 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 曹毅 |
| 地址： | 215000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 超高压 提取 金银花 中绿原酸 木犀 分析 方法 | ||
1.一种快速、高效提取金银花中绿原酸和木犀草苷并进行HPLC定量分析方法，包括如下步骤：
1）超高压提取：首先将干燥的的金银花粉碎过60-80目筛，再将金银花粉末按1:10-1:100的固液比加入水或乙醇（浓度为10%-90%）、甲醇、正丁醇有机溶剂，混合密封后在常温下浸泡0 -24 h，再将该混合物置于高压容器中，在20-60℃下施加100-500MPa压力进行浸取，其保压时间为1-5min，卸压后将提取物进行离心分离，得金银花提取液,
2）定量分析：取离心后得到的上清液2ml于10ml的容量瓶中，用蒸馏水定容，冷藏备用；HPLC条件为：Cosmosil π-NAP C18 色谱柱(5 μm, 4.6 mm × 250 mm)；流动相：A：B = 乙腈：0.4%磷酸溶液；梯度洗脱条件：0～15min，B：90-80%，15～30min，B：80%，30～40min，B: 80-70%；柱温：30℃；流速：1ml/min；检测波长：327nm，350nm；进样量：20μL。
2.根据权利要求1所述的快速、高效提取金银花中绿原酸和木犀草苷并进行HPLC定量分析方法，其特征在于，所述步骤（1）中的超高压提取(ultrahigh-pressure extraction,UHPE), 全称为“冷等静压技术”，是指在常温下用100-1000MPa的流体静压力作用于提取溶剂和中药的混合液上, 并在预定压力下保持一段时间, 使植物细胞内外压力达到平衡后迅速卸压,由于细胞内外渗透压力忽然增大, 细胞膜的结构发生变化, 使得细胞内的有效成分能够穿过细胞的各种膜而转移到细胞外的提取液中, 达到提取中药有效成分的目的。
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