[发明专利]丙型肝炎病毒核心抗原时间分辨免疫荧光分析法及检测试剂盒

权利要求书

1. “丙型肝炎病毒核心抗原时间分辨免疫荧光分析法”，其特征在于检测原理为:本发明采用时间分辨免疫荧光分析法，检测丙型肝炎病毒核心抗原；该发明建立双抗体夹心的基础之上，在这里，样品中的核心抗原首先被包被于微孔板上的抗HCV-cAg单克隆抗体I、II固相抗体捕获；在洗掉样品的其它部分，再加入抗HCV-cAg单克隆抗体III、 IV铕标记抗体，就可以形成抗HCV-cAg单克隆抗体固相抗体-核心抗原-抗HCV-cAg单克隆抗体铕标记抗体复合物，洗板加入增强液，用时间分辨分析仪测量荧光值，荧光值与样本中核心抗原浓度呈正相关，从而计算核心抗原浓度。

2. 丙型肝炎病毒核心抗原时间分辨免疫荧光分析法检测试剂盒，其特征在于包括盒体，设在盒体内的包被板和设在盒体内试剂及不干胶封片和使用说明书。

3.  根据权利要求2所述包被板，其特征在于包被板包被的是固相抗体，制备工艺是将包被抗体用Tris-HCl缓冲溶液稀释作为包被液，包被反应板，形成固相抗体，并用封闭液封闭。

4.根据权利要求3所述包被抗体，其特征在于此抗体是抗HCV-cAg单克隆抗体。

5. 根据权利要求3所述Tris-HCl缓冲溶液，其特征在于Tris-HCl缓冲溶液为PH为7.2浓度为50mmol/LTris-HCl。

6. 根据权利要求3所述包被液，其特征在于包被液中抗HCV-cAg单克隆抗体的浓度均为0. 1-20μg/ml。

7. 根据权利要求2所述设在盒体内试剂，其特征在于所述试剂包括: 抗HCV-cAg铕标记抗体、HCV核心抗原标准品、分析缓冲液、25 X浓缩洗涤液、增强液。

8. 根据权利要求7所述抗HCV-cAg铕标记抗体，其特征在于镧系元素离子标记抗体制备: 取待标记抗体抗HCV-cAg单克隆抗体III、 IV均稀释至1mg/ml，用常规方法进行镧系元素离子标记。

9. 根据权利要求8所述镧系元素离子，其特征在于镧系元素离子为Eu³⁺。

10. 根据权利要求7所述HCV核心抗原标准品，其特征在于用小牛血清将HCV核心抗原稀释为0ng/ml，0.05ng/ml，0.5ng/ml，2 ng/ml，8 ng/ml，20 ng/ml六个浓度梯度。

11. 根据权利要求7所述分析缓冲液，其特征在于分析缓冲液为PH7.8的50mmol/L Tris-HCl，内含0. 9% NaCl, l% BSA,0. 5%酪蛋白，0. 1%Tween-20和0. 1%NaN3。