[发明专利]面粉中过氧化钙的检测试剂盒及过氧化钙检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及检测用试剂盒及其应用，尤其是涉及一种快速测定面粉中过氧化钙的试剂盒及对面粉中人为掺加过氧化钙定性和半定量的测定方法。 

背景技术

过氧化钙是淡黄色结晶粉末，分子量72.08，广泛用于食品、化工、纺织等行业。常用于改善小麦粉的后熟、面粉增白、麦粉增筋剂、面粉脱色剂、面包改良剂食用油漂白等领域。为了增加小麦粉的筋道和口感，面粉行业普遍加入过氧化苯甲酰、过氧化钙作为小麦粉增筋剂、增白剂。我国自2011年5月1日起，禁止在面粉生产中添加过氧化苯甲酰、过氧化钙[卫生部等七部(局)发布《关于撤销食品添加剂过氧化苯甲酰、过氧化钙的公告》(2011年第4号)]。 

将过氧化钙添加到面粉中，长期食用可能会致癌，对人体健康会产生很大的危害。而有些面粉生产厂家为了面粉脱色、加快面粉的熟化，可能违规滥加过氧化苯甲酰或过氧化钙。现有的国家标准、行业标准和公开文献中，还没有检测面粉中过氧化钙的方法以及快速测定试剂盒。因此，建立一个快速、准确的面粉中过氧化钙定性及半定量测定方法有重要意义。 

发明内容

本发明目的是提供一种对面粉中过氧化钙快速检测的试剂 盒，以及应用该试剂盒对面粉中过氧化钙进行定性和半定量的测定方法。为此，本发明采用如下的技术方案： 

面粉中过氧化钙快速测定试剂盒，其特征在于 

(1)塑料样品勺，装满一平勺面粉质量约2g； 

(2)带有刻度的一次性塑料滴管3mL； 

(3)50mL具塞玻璃比色管； 

(4)50mL玻璃或塑料量筒； 

(5)试管架，孔的直径适合50mL具塞玻璃比色管； 

(6)标准比色卡，标准比色卡为淡红色至深红色呈梯度变化的系列色卡，每条下面均对应其代表的过氧化钙的含量； 

(7)过氧化物酶显色试剂； 

(8)广泛pH试纸(1-14)和精密pH试纸(6.4-8.0)； 

(9)反应试剂：三个塑料瓶装的试剂，每瓶体积500-1000mL，分别为1％稀硫酸、20％稀氢氧化钠、0.1％氢氧化钠； 

(10)500mL塑料洗瓶。 

面粉中过氧化钙快速检测试剂盒的应用，其具体步骤是： 

(1)取一勺试样，加入1％稀硫酸20mL，涡旋混合均匀，充分反应10min； 

(2)加入20％氢氧化钠溶液用广泛pH试纸调节pH到5-6之间，然后用0.1％氢氧化钠溶液调节溶液pH值到7.0。 

(3)加入过氧化物酶显色试剂溶液2mL，定容到50mL，室温下显色5-10min后，观察颜色。 

(4)将所得颜色与标准比色卡对照。 

步骤(3)过氧化物酶试剂混合溶液由组合试剂构成，现用现配。A号瓶含辣根过氧化物酶2000U(活力单位);B号瓶含4-氨基安替比林0.00154mol/L的0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(pH＝7.6)200mL；C号瓶含0.022mol/L苯酚溶液200mL。使用时，先将B和C溶液充分混合，然后将A中的酶溶解在混合液中，轻轻摇动，使酶完全溶解，即为过氧化物酶试剂溶液，酶活力10U(活力单位)/mL。 

结果判定，样品溶液若不变色，则没有掺加过氧化钙，属于合格的面粉；溶液若有颜色变化，则为掺有过氧化钙。过氧化苯甲酰虽然也是面粉加工常用的增白剂，属于强氧化剂，但在该方法的条件下，在含过氧化苯甲酰1000mg/kg及以下含量条件下不影响检测结果。 

面粉中过氧过钙检测标准比色卡的制作方法： 

(1)精确称取10g不含过氧化钙的面粉作为空白基质，加入准确称量的过氧化钙标准品，配制成过氧化钙的系列加标含量，分别加入50mL质量浓度为1％稀硫酸，涡旋混匀，充分反应10min。 

(2)用20％和0.1％的氢氧化钠溶液调整pH值到7.0。 

(3)加入过氧化物酶组合试剂溶液，在37℃水浴锅中恒温显色20min，冷却至室温，定容至50mL。 

(4)将显色的标准溶液采集照片，将梯度变化的一组彩色 照片而制成标准比色卡。根据颜色的深浅来定性和半定量。 

制作方法(1)中所配制的空白基质加标含量梯度范围优选在20mg/kg-1000mg/kg之间，如20mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg、500mg/kg、1000mg/kg。 

有益效果：