[发明专利]人工合成的猪繁殖与呼吸综合征病毒多表位基因及应用有效
申请号: | 201210389745.2 | 申请日: | 2012-10-15 |
公开(公告)号: | CN103421817A | 公开(公告)日: | 2013-12-04 |
发明(设计)人: | 方六荣;肖少波;王荡;罗锐;吴群峰;李振;曾松林 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N15/40 | 分类号: | C12N15/40;C12N1/21;A61K48/00;A61P31/14;C12R1/19 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 张红兵 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 人工合成 繁殖 呼吸 综合征 病毒 多表位 基因 应用 | ||
1.一种人工合成的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原多表位基因mMEP,该基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。
2.权利要求1所述的基因,其特征在于:将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSVWUH3株的GP3、GP4、GP5、M和N蛋白的T细胞表位和修饰的GP5B细胞表位通过linker相连,并根据哺乳动物对密码子的偏爱性进行改造后人工合成,人工合成的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示;
其中:GP3的T1细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:3所示;
GP3的T2细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:4所示;
GP4的T1细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:5所示;
GP5的T1细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:6所示;
GP5的T2细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:7所示;
M蛋白的T1细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:8所示;
M蛋白的T2细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:9所示;
N蛋白的T1细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:10所示;
N蛋白的T2细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:11所示;
修饰的GP5B细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:12所示。
3.一种重组的大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α/pcDNA3.1-mMEP,保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),其保藏号为CCTCC NO:M 2012171,该大肠杆菌含有真核表达质粒pcDNA3.1-mMEP,该质粒中含有如权利要求1所述的多表位基因mMEP。
4.一种包含表达高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原多表位基因mMEP的DNA疫苗,其特征在于,所述的DNA疫苗为质粒pcDNA3.1-mMEP,它是由SEQ ID NO:1所示的基因mMEP用BamHI+NotI酶切后,纯化回收酶切产物,与用BamHI+NotI酶切的真核表达质粒pcDNA3.1(+)连接,获得表达高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原多表位基因mMEP的真核表达质粒pcDNA3.1-mMEP,以该真核表达质粒转化大肠杆菌得到,所述的大肠杆菌Escherichia coli DH5α/pcDNA3.1-mMEP的保藏号为CCTCC NO:M 2012171。
5.权利要求1所述人工合成的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原多表位基因mMEP在制备猪繁殖与呼吸综合征疫苗中的应用。
6.权利要求3所述的重组的大肠杆菌在制备猪繁殖与呼吸综合征疫苗中的应用。
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