[发明专利]人工合成的猪繁殖与呼吸综合征病毒多表位基因及应用有效

专利信息
申请号: 201210389745.2 申请日: 2012-10-15
公开(公告)号: CN103421817A 公开(公告)日: 2013-12-04
发明(设计)人: 方六荣;肖少波;王荡;罗锐;吴群峰;李振;曾松林 申请(专利权)人: 华中农业大学
主分类号: C12N15/40 分类号: C12N15/40;C12N1/21;A61K48/00;A61P31/14;C12R1/19
代理公司: 武汉宇晨专利事务所 42001 代理人: 张红兵
地址: 430070 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 人工合成 繁殖 呼吸 综合征 病毒 多表位 基因 应用
【权利要求书】:

1.一种人工合成的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原多表位基因mMEP,该基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。

2.权利要求1所述的基因,其特征在于:将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSVWUH3株的GP3、GP4、GP5、M和N蛋白的T细胞表位和修饰的GP5B细胞表位通过linker相连,并根据哺乳动物对密码子的偏爱性进行改造后人工合成,人工合成的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示;

其中:GP3的T1细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:3所示;

GP3的T2细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:4所示;

GP4的T1细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:5所示;

GP5的T1细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:6所示;

GP5的T2细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:7所示;

M蛋白的T1细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:8所示;

M蛋白的T2细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:9所示;

N蛋白的T1细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:10所示;

N蛋白的T2细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:11所示;

修饰的GP5B细胞表位氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:12所示。

3.一种重组的大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α/pcDNA3.1-mMEP,保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),其保藏号为CCTCC NO:M 2012171,该大肠杆菌含有真核表达质粒pcDNA3.1-mMEP,该质粒中含有如权利要求1所述的多表位基因mMEP。

4.一种包含表达高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原多表位基因mMEP的DNA疫苗,其特征在于,所述的DNA疫苗为质粒pcDNA3.1-mMEP,它是由SEQ ID NO:1所示的基因mMEP用BamHI+NotI酶切后,纯化回收酶切产物,与用BamHI+NotI酶切的真核表达质粒pcDNA3.1(+)连接,获得表达高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原多表位基因mMEP的真核表达质粒pcDNA3.1-mMEP,以该真核表达质粒转化大肠杆菌得到,所述的大肠杆菌Escherichia coli DH5α/pcDNA3.1-mMEP的保藏号为CCTCC  NO:M 2012171。

5.权利要求1所述人工合成的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原多表位基因mMEP在制备猪繁殖与呼吸综合征疫苗中的应用。

6.权利要求3所述的重组的大肠杆菌在制备猪繁殖与呼吸综合征疫苗中的应用。

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