[发明专利]蛋白质微阵列芯片的临界值一级参考品的制备方法、临界值系数的确定和实验结果判定方法

权利要求书

1.利用临界值一级参考品确定阳性对照品中各自身抗体指标的临界值系数的方法，其特征在于具体由以下步骤组成：

(1)临界值一级参考品制备

(1.1)选取阳性血清利用健康人阴性血清进行稀释，使稀释后的血清中每个指标在利用免疫斑点法检测，其结果为弱阳性而得到弱阳性血清；

(1.2)对按步骤(1.1)中所得到弱阳性血清作进一步梯度稀释，得到2～5个浓度梯度血清；

(1.3)对按步骤(1.2)中所得到的每个浓度梯度血清，进行芯片反应实验，每个浓度梯度血清重复10孔，对每个浓度梯度血清样本中各指标的信号值计算平均值标准差S_样品；

(1.4)取具有统计学意义数量的健康人阴性血清样本，进行芯片反应实验，计算阴性血清样本中各指标信号的百分位数Pr，取99分位数P值；

(1.5)比较步骤(1.3)中不同浓度梯度血清各个指标的值与步骤(1.4)步中的Pr值，以最接近于Pr值的那个浓度梯度血清的浓度作为制备为各指标临界值参考品浓度；

(1.6)按照步骤(1.5)步中确定的各指标临界值参考品浓度，选取阳性血清，用健康人阴性血清进行稀释制备临界值一级参考品；

(2)选用阳性对照品作为待测样本，进行芯片反应实验，重复反应10孔，计算阳性对照品的各个指标信号值平均值

(3)选用临界值一级参考品作为待测样本，进行芯片反应实验，重复反应2孔，计算临界值一级参考品的各个指标信号值平均值

(4)利用下述公式求取指标临界值系数

指标临界值系数＝阳性对照品中该指标信号值的平均值/临界值参考品该指标信号值的平均值

2.权利要求1所述的利用临界值一级参考品确定阳性对照品中各自身抗体指标的临界值系数的方法，其特征在于，所述步骤(1.1)和步骤(1.6)中的阳性血清为Jo-1、SSA、SSB、Sm、Scl-70、RNP自身抗体指标阳性的血清中的一个或多个。

3.权利要求1所述的利用临界值一级参考品确定阳性对照品中各自身抗体指标的临界值系数的方法，其特征在于，所述步骤(1.2)中，得到4个浓度梯度血清；所述步骤(1.5)中是比较步骤(1.3)中4个浓度梯度血清各个指标 值与步骤(1.4)步中的Pr值。

4.用于联合检测自身抗体蛋白质微阵列芯片的实验结果判定方法，其特征在于：利用蛋白质微阵列芯片和化学发光技术对多种自身抗体并行检测时，实验结果判定为研究对象，利用“临界值一级参考品”确定阳性对照品中各自身抗体指标的“临界值系数”，再利用每次实验中阳性对照品的信号值与“临界值系数”确定各自身抗体指标的临界值信号，并对实验结果作出判定。

5.如权利要求4所述的用于联合检测自身抗体蛋白质微阵列芯片的实验结果判定方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)临界值一级参考品的制备步骤；

(2)利用步骤(1)制备的临界值一级参考品，采用具有统计学数据处理方法，给阳性对照品中各自身抗体指标确定临界值系数步骤；

(3)在每次实验中，利用阳性对照品中的各指标信号值与对应的各指标的临界值系数确定此次实验中各指标的临界值信号，并对实验结果作出判定步骤。