[发明专利]一种电化学免疫传感器及制备方法

权利要求书

1.一种电化学免疫传感器，其特征在于，玻碳电极通过-Ph-与金纳米颗粒通过化学键固定连接在一起，在修饰有金纳米颗粒的玻碳电极上修饰有抗体，同时封端的还有牛血清蛋白。

2.一种电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，是通过碳金键固定金纳米颗粒增强稳定性的电化学免疫传感器的制备方法，具体包括以下步骤：

（1）制备5~65nm的金纳米颗粒溶胶溶液；

（2）将对苯二胺H₂N-Ph-NH₂溶于0.5~5M HCl中形成H₂N-Ph-NH₂的HCl溶液，H₂N-Ph-NH₂的浓度为1~10mM，然后与浓度为1~10mM NaNO₂溶液混合，在冰水浴中、氮气保护下反应10~20分钟，其中H₂N-Ph-NH₂的HCl溶液与NaNO₂溶液的体积比为（5~10）：（10~20）；将打磨干净的玻碳电极放入该混合液中，以饱和氯化钾Ag/AgCl为参比电极、铂电极为对电极，在0.6到-1.0V间进行循环伏安扫描；此时玻碳电极表面通过碳碳键修饰上了-Ph-NH₂；

（3）将步骤（2）中得到的玻碳电极浸入NaNO₂和HCl的混合溶液中反应15~25分钟，NaNO₂和HCl的混合溶液是由浓度为1~10mM的NaNO₂和浓度为0.5~5M HCl按照体积比为（1~10）：（1~20）混合得到的；接着将该电极放入金纳米颗粒溶液中，以饱和氯化钾Ag/AgCl为参比电极、铂电极为对电极，在0.6到-0.8V间进行循环伏安扫描。此时金纳米颗粒就通过碳金键固定在了玻碳电极表面。

（4）在步骤（3）中得到的已经修饰了金纳米颗粒的玻碳电极上滴涂上一层含有抗体的磷酸盐缓冲液，其中含有抗体的磷酸盐缓冲液中抗体的浓度为0.1~10mg mL^-1，磷酸盐缓冲液浓度为0.1~1M、pH为6.5~7.5；然后放置在4℃下孵化6~12小时；再将该电极侵入浓度为10~100mg mL^-1的牛血清蛋白（BSA）溶液中常温封闭1~3小时。