[发明专利]一种电化学免疫传感器及制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种电化学免疫传感器的制备方法，尤其涉及一种通过碳金键固定金纳米颗粒增强稳定性的电化学免疫传感器电化学免疫传感器的制备方法，属于传感器技术领域。

背景技术

电化学免疫法由于其具有较高的灵敏度，较低的检出限以及较短的分析时间而受到广发的关注。然而制约电化学免疫传感器发展的一个重大问题就是其稳定性。由于纳米技术的迅猛发展，人们发现将纳米技术运用于电化学免疫传感器可以进一步改善其性质。其中金颗纳米粒因其具有合成简便、比表面积大和吸附能力强的优势而受到人们的格外关注。近年来随着纳米技术的发展，纳米材料由于其本身独特的物理和化学性质被广泛应用于免疫传感器的制备。而众多的纳米材料中，金颗纳米粒因其具有合成简便、比表面积大和吸附能力强的优势而受到人们的格外关注。金纳米颗粒良好的生物相容性和电子传导能力可以在电极表面提供一个温和的不受限制的微环境促进表面生物分子和电极之间的电子传递，从而使其常作为一种膜修饰材料而被用于电化学免疫传感器的构建[Xu,H.;Hong,R.;Wang,X.Y.;Arvizo,R.;You,C.C.;Samanta,B.;Patra,D.;Tuominen,M.T.;Rotello,V.M.Adv.Mater.2007,19,1383-1386]。然而，含有金纳米颗粒的修饰膜的长期稳定性是其进一步应用中一个亟待解决的问题。常见的固定金纳米颗粒方法有静电吸引法、包埋法以及利用化学键（S-Au、NH-Au键）的方法^[1-7]。这些方法存在着以下一些缺点：1）对基底物质的附着力不够（包埋法、S-Au、NH-Au键法）；2）在特定的化学环境里不稳定（静电吸引法、包埋法）；3）金纳米颗粒固定的多少及方向不可控（包埋法、S-Au、NH-Au键法）以及4）固定金纳米颗粒的用时太长（静电吸引法）。因此，需要找到一种新型的固定方法以解决这些问题。

[1]Wang,Y.;Tang,Z.Y.;Correa-Duarte,M.A.;Liz-Marzan,L.M.;Kotov,N.A.J.Am.Chem.Soc.2003,125,2830–2831.

[2]Xu,H.;Hong,R.;Wang,X.Y.;Arvizo,R.;You,C.C.;Samanta,B.;Patra,D.;Tuominen,M.T.;Rotello,V.M.Adv.Mater.2007,19,1383–1386.

[3]Haryono,A.;Binder,W.H.Small 2006,2,600–611.

[4]Shenhar,R.;Jeoung,E.;Srivastava,S.;Norsten,T.B.;Rotello,V.M.;Adv.Mater.2005,17,2206–2210.

[5]Pacifico,J.;Gomez,D.;Mulvaney,P.Adv.Mater.2005,17,415–418.

[6]Tognarelli,D.J.;Miller,R.B.;Pompano,R.R.;Loftus,A.F.;Sheibley,D.J.;Leopold,M.C.Langmuir 2005,21,11119–11127.

[7]Yamanoi,Y.;Yonezawa,T.;Shirahata,N.;Nishihara,H.Langmuir 2004,20,1054–1056.

所以，本发明的目的在于找到一种新的固定方法以解决含有金纳米颗粒修饰膜的电化学免疫传感器的长期稳定性的问题。该方法可稳定、快速、简便的将金纳米颗粒固定到玻碳电极表面。

发明内容

本发明提出了一种以碳金键固定金纳米颗粒以增强稳定性的电化学免疫传感器的制备方法。本发明的特点是该电化学免疫传感器具有良好的稳定性及重现性、较广的线性范围、较低的检出限以及简单快速的制备方法。

一种电化学免疫传感器，其特征在于，玻碳电极通过-Ph-与金纳米颗粒通过化学键固定连接在一起，在修饰有金纳米颗粒的玻碳电极上修饰有抗体，同时封端的还有牛血清蛋白。

一种电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，是通过碳金键固定金纳米颗粒增强稳定性的电化学免疫传感器的制备方法，具体包括以下步骤：

（1）制备5~65nm的金纳米颗粒溶胶溶液，可参见参照文献Nature（1973,241,20）；