[发明专利]一种检测异尖线虫病的免疫层析试条及其制备方法无效
申请号: | 201210401889.5 | 申请日: | 2012-10-19 |
公开(公告)号: | CN102879563A | 公开(公告)日: | 2013-01-16 |
发明(设计)人: | 周洋;陈家旭;石锋;蔡玉春 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/531;G01N33/544 |
代理公司: | 上海世贸专利代理有限责任公司 31128 | 代理人: | 严新德 |
地址: | 200025 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 线虫病 免疫 层析 及其 制备 方法 | ||
1.一种用免疫学方法检测异尖线虫病的试剂,其特征在于:包括以下组份:
(1)异尖线虫病的天然抗原(2)抗人或抗哺乳动物IgG的探针;
其中,异尖线虫病的天然抗原按如下方法制备:将活的异尖线虫Ⅲ期幼虫,用生理盐水洗净后,用滤纸吸取虫体水分,倒入匀浆器中加入缓冲液后搅碎,反复冻融,冰浴超声粉碎后,0-6℃离心,取上清即为异尖线虫病天然抗原。
2.如权利要求1所述的用免疫学方法检测异尖线虫病的试剂,其特征在于:所述的抗人或抗哺乳动物IgG探针是用人或哺乳动物IgG免疫鼠、兔、或者羊获得的多抗或单克隆抗体。
3.如权利要求1所述的用免疫学方法检测异尖线虫病的试剂,其特征在于:所述的抗人或抗哺乳动物IgG探针是鼠抗人IgG的单克隆抗体、或者金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)、或者链球菌G蛋白(SPG)、或者是标记的鼠抗人IgG的单克隆抗体、或者是标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)、或者标记的链球菌G蛋白(SPG)。
4.如权利要求3所述的用免疫学方法检测异尖线虫病的试剂,其特征在于:所述的标记为胶体金、染料或者乳胶标记。
5.一种检测异尖线虫病的免疫层析试纸条,其特征在于:包括一个样品垫和一个纤维素膜,所述的样品垫和所述的纤维素膜之间设置有一个含有胶体金标记探针的金标垫,所述的金标垫、所述的样品垫分别和一个纤维素膜紧密连接,在所述的纤维素膜的远离金标垫的一端设置有一个吸水垫,所述的吸水垫和所述的纤维素膜紧密连接,所述纤维素膜上远离金标垫的一端设置有一个质控线,在质控线和金标垫之间的纤维素膜上设置一个检测线,所述的检测线有异尖线虫病的天然抗原组成,所述的质控线由特异性结合胶体金标记探针的抗体组成。
6.如权利要求5所述的检测异尖线虫病的免疫层析试纸条,其特征在于:所述的胶体金标记探针为用人或哺乳动物IgG免疫鼠、兔、或者羊获得的多抗或单克隆抗体。
7.如权利要求5所述的检测异尖线虫病的免疫层析试纸条,其特征在于:所述标记探针为金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA),或者链球菌G蛋白(SPG)。
8.如权利要求5所述的检测异尖线虫病的免疫层析试纸条,其特征在于:所述的质控线中的抗体为鸡抗SPG的IgY抗体。
9.如权利要求5所述的检测异尖线虫病的免疫层析试纸条,其特征在于:所述的异尖线虫病的天然抗原为异尖线虫Ⅲ期幼虫提取的粗抗原,其蛋白浓度为1~10mg/mL,喷涂量为10μL /cm2;胶体金标记探针浓度(以蛋白浓度计):1~5mg/15~20mL;鸡抗SPG的IgY抗体溶液浓度为0.1~5mg/mL,喷涂量为10μL /cm2。
10.如权利要求5所述的检测异尖线虫病的免疫层析试纸条,其特征在于:所述的纤维素膜选自硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜;所述的金标垫选自玻璃纤维膜或聚脂膜;所述样品垫选自滤血膜、玻璃纤维或吸水纸,其中滤血膜是棉籽绒和纤维素的混合物或者玻璃纤维和纤维素混合物,所述吸水垫为吸水纸。
11.如权利要求5所述的检测异尖线虫病的免疫层析试纸条,其特征在于:所述的纤维素膜、样品垫、金标垫、吸水垫设置在一个起支撑作用的背板上。
12.如权利要求11所述的检测异尖线虫病的免疫层析试纸条,其特征在于:所述带有背板的免疫层析试纸条设置在一个检测盒体中,所述的盒体的对应于滤血膜样品垫的部位设有检测孔,对应于检测线和质控线的部位设有观测窗。
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