[发明专利]一种半夏离体球茎的高效诱导方法无效
申请号: | 201210401988.3 | 申请日: | 2012-10-19 |
公开(公告)号: | CN102919122A | 公开(公告)日: | 2013-02-13 |
发明(设计)人: | 刘红美;方小波;梁大勇 | 申请(专利权)人: | 遵义市龙驰生物科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 谷庆红 |
地址: | 563100 贵州*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 半夏 球茎 高效 诱导 方法 | ||
1.一种半夏离体球茎的高效诱导方法,其特征在于:主要包括以下步骤:
(1)外植体选择:选择半夏叶柄、嫩叶、茎尖、株芽、球茎中的任一种作为外植体;
(2)胚状体诱导培养:配制胚状体诱导培养基为:MS+6-BA 0.1~0.5mg/L+IBA 0.1~0.5mg/L+市售白糖3~6%+琼脂粉0.45~0.6%,pH5.8~6.0;将步骤(1)所得外植体切断为长0.8~1.2cm的继代扩繁材料,接种在胚状体诱导培养基中,23℃~27℃、光照1200Lx、12h/d条件下培养30~40天;
(3)离体球茎诱导培养:配制离体球茎诱导培养基为:1/2MS+6-BA 0.1~0.3mg/L+NAA 0.1~0.2mg/L+市售白糖3~9%,pH 5.8~6.0;将步骤(2)所得的胚状体,以1:2的比例接种于离体球茎诱导培养基中,23℃~27℃,室内自然光照条件下培养40~45天,胚状体就长成一粒粒的离体球茎;
(4)大田移栽或贮藏:将离体球茎取出,将黏附的培养基冲洗干净,阴干表面的水分,直接进行大田移栽,或者贮藏起来。
2.根据权利要求1所述的一种半夏离体球茎的高效诱导方法,其特征在于:所述步骤(3)中的培养容器为透明的玻璃瓶和/或塑料袋。
3.根据权利要求1所述的一种半夏离体球茎的高效诱导方法,其特征在于:所述步骤(1)中的外植体优选为叶柄。
4.根据权利要求1所述的一种半夏离体球茎的高效诱导方法,其特征在于:所述步骤(1)中的外植体在切断前经过常规灭菌处理。
5.根据权利要求1所述的一种半夏离体球茎的高效诱导方法,其特征在于:所述步骤(2)中的胚状体诱导培养基为:MS+6-BA 0.2~0.4mg/L+IBA 0.2~0.4mg/L+市售白糖3~6%+琼脂粉0.5~0.55%,pH5.8~6.0。
6.根据权利要求1所述的一种半夏离体球茎的高效诱导方法,其特征在于:所述步骤(3)中的离体球茎诱导培养基为:1/2MS+6-BA 0.2~0.3mg/L+NAA0.15~0.2mg/L+市售白糖5~8%,pH 5.8~6.0。
7.根据权利要求1所述的一种半夏离体球茎的高效诱导方法,其特征在于:所述步骤(2)和步骤(3)中的温度条件为24℃~26℃。
8.根据权利要求1所述的一种半夏离体球茎的高效诱导方法,其特征在于:所述步骤(2)和步骤(3)中的培养基经过常规湿热灭菌处理15~30min。
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