[发明专利]一种奇异变形菌及其在微生物被膜抑制和减毒中的应用有效
申请号: | 201210403221.4 | 申请日: | 2012-10-22 |
公开(公告)号: | CN102911899A | 公开(公告)日: | 2013-02-06 |
发明(设计)人: | 蔡中华;余时琛;陈璐;常虹;朱小山;周进 | 申请(专利权)人: | 清华大学深圳研究生院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12Q1/04;A61K35/74;A61P31/04;C12R1/01 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 518055 广东省深*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 奇异 变形 及其 微生物 抑制 中的 应用 | ||
1.奇异变形菌(Proteus mirabilis)10#,它在中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.6426。
2.一种制剂,其活性成分为权利要求1所述奇异变形菌(Proteus mirabilis)10#CGMCC No.6426的代谢物。
3.权利要求1所述的奇异变形菌(Proteus mirabilis)10#CGMCC No.6426,或权利要求2所述的制剂在如下(a1)-(a3)中的应用:
(a1)制备抑制病原菌生物被膜形成的产品;
(a2)制备抑制病原菌毒力因子的产品;
(a3)鉴定病原菌生物被膜抑制菌。
4.权利要求1所述的奇异变形菌(Proteus mirabilis)10#CGMCC No.6426,或权利要求2所述的制剂在如下(b1)-(b4)中应用:
(b1)制备降低病原菌生物被膜形成总量的产品;
(b2)制备抑制病原菌弹性蛋白酶产生量的产品;
(b3)制备抑制病原菌水解酶的产生量的产品;
(b4)制备与抗生素共同作用提高对病原菌的杀伤效率的产品。
5.根据权利要求3或4所述的应用,其特征在于:所述病原菌为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa);所述水解酶为β-葡萄糖苷酶、磷酸酶或脂酶。
6.权利要求2所述制剂的制备方法,包括如下步骤:发酵培养权利要求1所述的奇异变形菌(Proteus mirabilis)10#CGMCC No.6426,收集发酵产物,获得所述制剂。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述发酵培养的温度为28~37℃;或
所述发酵培养的时间为24-36小时;或
所述发酵培养的方式为旋转震荡培养,所述旋转震荡培养的转速为150转/分钟~220转/分钟,旋转半径为13.5cm;或
所述发酵培养的培养基为LB液体培养基。
8.根据权利要求6或7所述的方法,其特征在于:所述方法中,在所述收集发酵产物的步骤后还包括将所述发酵产物离心,取上清过滤,获得滤液的步骤。
9.一种鉴定或辅助鉴定病原菌生物被膜抑制菌的方法,为如下(A)或(B):
所述(A)包括如下(1)和(2)的步骤:
(1)向所述病原菌的生长体系中添加待检测菌的发酵产物作为实验组,以不添加所述待检测菌的发酵产物的空白的所述病原菌的生长体系作为对照组;检测所述实验组和所述对照组中所述病原菌的生物被膜的含量情况;
(2)根据如下方法判断所述待检测菌是否为所述病原菌的生物被膜抑制菌:若所述实验组中所述病原菌的生物被膜形成总量低于所述对照组中所述病原菌的生物被膜形成总量,则所述待检测菌为或候选为所述病原菌的生物被膜抑制菌;反之,则所述待检测菌不为或候选不为所述病原菌的生物被膜抑制菌;
所述(B)包括如下(3)和(4)的步骤:
(3)向所述病原菌的生长体系中添加待检测菌的发酵产物作为实验组,以不添加所述待检测菌的发酵产物的空白的所述病原菌的生长体系作为对照组;检测所述实验组和所述对照组中所述病原菌的毒力因子的含量情况;
(4)根据如下方法判断所述待检测菌是否为所述病原菌的生物被膜抑制菌:若所述实验组中所述病原菌的毒力因子的产生量低于所述对照组中所述病原菌的毒力因子的产生量,则所述待检测菌为或候选为所述病原菌的生物被膜抑制菌;反之,则所述待检测菌不为或候选不为所述病原菌的生物被膜抑制菌;
所述病原菌为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa);所述毒力因子为弹性蛋白酶或水解酶;所述水解酶具体为β-葡萄糖苷酶、磷酸酶或脂酶。
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