[发明专利]一种奇异变形菌及其在微生物被膜抑制和减毒中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种与生物被膜抑制和减毒相关的细菌菌株，特别涉及一种与生物被膜抑制和减毒相关的奇异变形菌（Proteus mirabilis）及其应用。

背景技术

众所周知，在当今生物及医药领域，对抗细菌的入侵和感染的主要方法是使用抗生素。但是抗生素的频繁使用，却使细菌产生了日趋严重的耐药性，大大降低抗生素的治疗效果。最近，更是出现了“超级细菌”，对抗生素完全免疫。这无疑为人类与动植物的健康敲响了警钟。因此，寻找治疗细菌感染的新方法已成为燃眉之急。

研究表明，细菌产生耐药性的原因主要来自两个方面：一方面是因为抗生素对病原菌产生胁迫压力，而病原菌在压力下产生适应性变异；另一方面是因为在正常情况下，致病菌会形成微生物被膜，为其提供一层保护屏障。细菌生物被膜，是指细菌吸附于惰性物体如医学材料或机体黏膜表面后，分泌多糖基质、纤维蛋白、脂蛋白等多糖蛋白复合物，使细菌相互粘连并将自身菌落聚集缠绕其中形成的膜样物。现已证实约有90%的微生物生活在微生物被膜（bacterial biofilm，BF）系统中，80%的细菌性疾病与细菌生物膜有关。受微生物被膜的保护，大多数药物只能杀灭微生物被膜表面的微生物，而微生物被膜内部的微生物则是产生变异的主要原因。由于微生物被膜在病原菌耐药性方面的巨大作用，因此，通过干扰或抑制病原菌微生物被膜来减弱其致病性已成为防治细菌性疾病的新思路。

微生物被膜抑制剂主要通过抑制微生物之间的群体交流达到控制毒力释放并抑制生物膜结构的目的，它并不对微生物本身进行杀灭，因此，不会对微生物的生存产生压力，也就不会导致新的“耐药性”产生。它不仅可以控制病原微生物的毒性，而且可以通过抑制微生物的生物被膜，使病原微生物丧失保护，增加对普通药物的易感性。因此，微生物被膜抑制剂很有可能成为“超级抗生素”，实现对多种致病菌甚至包括“超级细菌”的控制。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种与生物被膜抑制和减毒相关的细菌菌株。

本发明所提供的细菌菌株具体为奇异变形菌（Proteus mirabilis）10#，该菌株已于2012年8月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编：100101），保藏登记号为CGMCC No.6426。

所述奇异变形菌（Proteus mirabilis）10#CGMCC No.6426为革兰氏阴性菌，菌落成淡黄色，表面湿润、表面平坦、边缘放射状，在显微镜下观察为短棒状。生理生化特征实验结果显示明胶水解阳性，鸟氨酸脱羧酶阳性，尿素酶阳性，木糖阳性。其16s rDNA的序列详见序列表中序列1。

本发明的另一个目的是提供一种制剂。

本发明所提供的制剂的活性成分为所述奇异变形菌（Proteus mirabilis）10#CGMCC No.6426的代谢物。

所述奇异变形菌（Proteus mirabilis）10#CGMCC No.6426，或所述制剂在如下（a1）-（a3）中的应用也属于本发明的保护范围：

（a1）制备抑制病原菌生物被膜形成的产品；

（a2）制备抑制病原菌毒力因子的产品；

（a3）鉴定病原菌生物被膜抑制菌。

所述奇异变形菌（Proteus mirabilis）10#CGMCC No.6426，或所述制剂在如下（b1）-（b4）中的应用也属于本发明的保护范围：

（b1）制备降低病原菌生物被膜形成总量的产品；

（b2）制备抑制病原菌弹性蛋白酶产生量的产品；

（b3）制备抑制病原菌水解酶产生量的产品；

（b4）制备与抗生素共同作用提高对病原菌的杀伤效率的产品。

在上述应用中，所述病原菌具体可为铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa），其对应的抗生素为卡那霉素。

在上述应用中，所述水解酶具体可为β-葡萄糖苷酶、磷酸酶或脂酶。

本发明的再一个目的是提供所述制剂的制备方法。

本发明所提供的所述制剂的制备方法具体可包括如下步骤：发酵培养所述奇异变形菌（Proteus mirabilis）10#CGMCC No.6426，收集发酵产物（即所述奇异变形菌（Proteus mirabilis）10#CGMCC No.6426的代谢物），获得所述制剂。