[发明专利]一种从银杏叶中制备多种活性物质的方法

说明书

技术领域

本发明属于化学物质或药品的制造方法，具体涉及以银杏叶为原料，经过提取分离纯化，得到多种活性物质的方法。

背景技术

2亿年前银杏科植物广泛存在于亚、非、欧、南美洲和澳洲。几乎遍布于整个地球表面。由于第三纪和第四纪时期地球发生巨变，大部分银杏科植物灭绝，仅有银杏一种幸存，因而被称为“活化石”植物。银杏是我国特有的珍贵树种，尤其长江以南和台湾省，占世界银杏资源总量的70％以上。随着银杏叶中有效成分的药用、保健等综合价值的挖掘和开发，对银杏叶的系统研究在世界范围内掀起了高潮，其银杏叶化学成分的药用机制和临床运用成为研究的热点。

中国很早就意识到了银杏的药用价值，明代李时珍在《本草纲目》中提到，银杏“人肺经，益肺气，定喘咳，缩小便”。20世纪60年代，德国科学家发现银杏黄酮能防治心脑血管疾病和降血脂。20世纪70年代，德国医学媒体报道，银杏叶提取物能增加中枢和外周血管血流量，可用于心、脑及外周血管缺血性疾病。20世纪80年代，法国科学家Brapuat发现了银杏叶的内酯成分有很强的拮抗血小板活化因子(PAF)的作用，随后银杏叶制剂作为第一个进入临床的PAF拮抗剂进行了三期临床观察，银杏叶制剂的研究和开发进入了一个新的领域。1991年，美国哈佛大学的学者因发现银杏内酯B的分子结构而荣获诺贝尔奖。至今在世界上同一种研究中，唯有银杏两次获诺贝尔奖。随后，银杏叶提取物的用途得到更深入、广泛的研究，如用来治疗慢性肾功能衰竭、冠心病、突发性耳聋、胃黏膜损伤、精神分裂症、阿尔茨海默症、脑血栓等病症，并可抗肿瘤。更进一步的研究也表明，银杏内酯B在临床上用于中风、器官移植排斥反应、休克等的治疗和血液透析，其效果明显优于银杏内酯混合物，于是国际市场又出现了银杏叶的纯化提取物B。

银杏叶中有效成分的制备工艺主要有以下类型：1、水蒸汽蒸馏法：将银杏叶干燥、粉碎后，100～120℃水蒸馏，蒸馏液冷却后，用非极性大孔树脂吸附、浓缩，然后用乙醇洗脱，蒸干即得到粉状结晶。该方法提取率很低；2、有机溶液萃取法：其提取工艺的专利也较多，可归纳为两种形式：一种是制备银杏叶粗提物，这类方法是把银杏叶干燥、粉碎后用有机溶剂(例如乙醇或丙酮、石油醚等)浸泡、萃取、过滤，滤液中的溶剂用减压蒸馏除去后，得银杏浸膏。这种方法的制备简单，产品的收率高(约12％～14％)，但产品中杂质含量较高，通常呈棕黑色。另一种是制备银杏叶精提物，这种方法通常在粗提物制备基础上，进一步精制，常用的精制方法有：液-液萃取(例如用二氯甲烷、氯仿或苯脱脂)，沉淀法(NH₄OH或PbAc等沉淀剂)以及硅藻土或硅胶吸附法。再通过干燥、过滤、减压浓缩除去溶剂后，即可得到精提物。一般为黄褐色粉末，收率为1～3％，该类方法耗费大量有机试剂，且得到的产品纯度不高；3、超临界流体萃取法：近十年来，用该技术提取天然植物中的药用有效成分也越来越广泛。它和上述的提取工艺相比较，具有提取率高，无溶剂残留毒性、天然植物中活性成分和热不稳定性成分不易被分解破坏而保持其天然特征等优点，但是随着超临界流体萃取法的深入研究，该技术的不足在于不能得到需要分离的单组分纯品，对于银杏内酯A、B、C只是粗分离。

目前，还有许多关于采用柱分离提取、纯化、制备银杏提取物的方法，但这些方法基本上都耗大量有机溶剂，引起环境污染；或运用较为复杂的分离技术难以放大生产；或取效率不高，原料利用率较低。

发明内容

本发明提供一种从银杏叶中制备多种活性物质的方法，采用强极性或极性大孔吸附树脂分离，解决现有制备银杏提取物银杏酸偏高的问题，并解决现有提取及制备银杏活性物质耗费大量有机溶剂，引起环境污染；或运用较为复杂的分离技术难以放大生产；或取效率不高，原料利用率较低等问题。并能同时得到银杏多糖、银杏提取物、银杏总黄酮、银杏总内酯、银杏内酯A、B、C单体等多种活性物质。

本发明的一种从银杏叶中制备多种活性物质的方法，包括：

(1)原料前处理步骤；银杏叶干品原料粉碎后，加入含有纤维素酶及果胶酶的水溶液进行破壁反应，烘干得到提取原料；

(2)提取步骤；在步骤(1)得到的提取原料，50～80％乙醇提取，60～90℃下提取，料液比1∶8～1∶20，提取2～4次，合并后得到提取液；

(3)多糖沉淀步骤；沉淀分离步骤；将步骤(3)中得到的提取液浓缩后，加入絮凝剂进行沉淀反应，过滤得到沉淀物银杏多糖；过滤得到的上清液为沉淀分离液；

(4)大孔树脂分离步骤；将步骤(3)中得到的沉淀分离液，经过极性或强极性大孔树脂分离，得到银杏提取物；