[发明专利]检测BCL2L11基因多态性的方法

权利要求书

1.一种检测BCL2L11基因多态性的方法，其特征在于，其包括如下实现步骤：

设计了两对引物，突变型引物以及野生型引物，一对引物跨越2903bp的缺失区域，当此片段未缺失时，实验条件限制反应，扩增不出如此长的片段的；当此片段缺失时，会扩增出一个261bp的片段；

另外一对引物在2903bp的缺失区域中，当此片段未缺失，会扩增出一个365bp的片段。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述扩增的野生型引物序列为：

正向引物wmF：CAGAACAGACACTGGAACAAAATGA

反向引物wR：GGGAGCATTTTCATGAGTACAACAA。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述扩增的突变型引物序列为：

正向引物wmF：CAGAACAGACACTGGAACAAAATGA（与野生型F相同）

反向引物mR：GGTGGCCATACAAATCTAAGCCAG。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述具体处理步骤如下：

（1）样本处理，取外周血2ml于EDTA抗凝管中，轻柔地颠倒混匀，4℃保存；

（2）DNA提取，取200μL抗凝血用试剂盒提取DNA，采用电泳凝胶成 像对DNA纯度和浓度作检测；

（3）反应体系的配置，在每一个反应空中加入一定的反应体系；

（4）按一定的程序进行扩增；

（5）电泳检测扩增结果。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述反应体系如下：

。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述按以下程序进行扩增：

95℃3min 

94℃30sec→（50-60℃）都行30sec→72℃30sec，40个循环

72℃5min→4℃。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述电泳检测扩增结果步骤如下：配2％琼脂糖凝胶，取9μL（3）扩增的产物与10倍浓度上样缓冲液混匀后上样，120V电泳30min，紫外判断PCR结果；当片段缺失时，会扩增出一个261bp的片段；当此片段未缺失，会扩增出一个365bp的片段；如果261bp和365bp产物同时存在，此样本为杂合子。