[发明专利]防治蓝莓枯萎病的生防菌株KMXU1及其生防菌剂无效
申请号: | 201210410181.6 | 申请日: | 2012-10-24 |
公开(公告)号: | CN103013854A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
发明(设计)人: | 余磊;赵建荣 | 申请(专利权)人: | 昆明学院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/07 |
代理公司: | 昆明今威专利商标代理有限公司 53115 | 代理人: | 杨宏珍 |
地址: | 650214 云南*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 防治 蓝莓 枯萎病 菌株 kmxu1 及其 生防菌剂 | ||
1.一种防治蓝莓枯萎病的生防菌株KMXU1,为解淀粉芽孢杆菌 (Bacillus amyloliquefaciens),2012年9月21日保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心,保藏号:CGMCC NO. 6598。
2.用权利要求1所述的生防菌株KMXU1制备的防治蓝莓枯萎病生防菌剂,其特征在于该生防菌剂经如下步骤得到:
a. 将菌株KMXU1移植到试管中进行一环活化,28℃ 培养48小时;试管中的PSA培养基为:称取200g马铃薯,洗净去皮切碎,加水1000ml煮沸半个小时,纱布过滤,再加20g普通蔗糖糖和17g琼脂,溶解后趁热纱布过滤,15磅温度为121℃的蒸气灭菌20分钟;
b. 取一环活化后的菌苔移入用1000ml锥形瓶装的600ml配方为:胰蛋白胨 10g/L,酵母提取物 5g/L,氯化钠 5g/L,pH7.0的LB培养液中,在120转/min、28 ℃下培养72小时,获得发酵菌液;
c. 将发酵菌液按接种量1:200培的比例接种于种子罐中与b步骤相同的LB培养液中发酵培养,种子罐的温度29-31℃,发酵16-18小时后,获得发酵用菌种;
d. 将发酵用菌种按接种量1:20倍的比例接种于发酵罐中与b步骤相同的LB培养液中发酵培养,发酵罐的温度为29-31℃,发酵72-96小时,当发酵罐中的发酵液中芽孢含量大于或等于85-90%,酸碱度为6.5~7.5时,储存作为生防菌液;
e. 将生防菌液5000rpm离心6 min,取离心后的菌体与保藏液按1:50 g/ml 配成活性菌剂,成品中活菌总浓度为2×1010~2×1011 CFU/ml;菌体保藏液为:0.015mol/L磷酸盐缓冲液。
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