[发明专利]芋螺毒素的生物学制备方法及其产品和用途

权利要求书

1.优化的芋螺毒素αACT1基因，其特征在于：其核苷酸序列为SEQID No.2所示。

2.含有权利要求1所述优化的芋螺毒素αACT1基因的重组表达载体；优选的，所述的重组表达载体是重组杆状病毒转移表达载体。

3.含有权利要求2所述表达载体的宿主细胞；优选的，所述的宿主细胞是昆虫宿主或昆虫细胞；更优选的，所述的昆虫宿主是家蚕，所述的昆虫细胞是家蚕细胞。

4.权利要求1所述的芋螺毒素αACT1基因在制备芋螺毒素中的用途。

5.一种芋螺毒素的生物学制备方法，其特征在于，包括：(1)将芋螺毒素基因克隆到杆状病毒运载载体的表达盒中，构建得到重组转移表达载体；(2)将所构建的重组转移表达载体与杆状病毒DNA共转染昆虫细胞，获得重组杆状病毒；(3)用重组杆状病毒感染昆虫宿主或昆虫细胞；培养被感染的昆虫宿主，收获并纯化所表达的产物，即得。

6.按照权利要求5所述的生物学制备方法，其特征在于：所述的芋螺毒素是α-芋螺毒素、μ-芋螺毒素、ω-芋螺毒素或δ-芋螺毒素中的任意一种；优选为α-芋螺毒素；更优选为SEQ ID NO：1所示的原始的芋螺毒素αACT基因或SEQ ID NO：2所示的优化后的芋螺毒素基因，最优选为SEQID NO：2所示的优化后的芋螺毒素αACT1基因。

7.按照权利要求5所述的生物学制备方法，其特征在于：所述的杆状病毒运载载体的表达盒包括启动子和增强子，所述的启动子优选为多角体蛋白启动子、p10启动子或ie-1启动子中的任意一种；

所述的杆状病毒选自BmNPV、AcMNPV、ApNPV、HaNPV、HzNPV、LdMNPV、MbMNPV、OpMNPV、SIMNPV、SeMNPV或SpltNPV中的任意一种；优选的，所述杆状病毒为家蚕杆状病毒BmNPV，进一步优选为家蚕杆状病毒亲本株Bm-NPV-ZJ8；

所述的昆虫宿主选自家蚕(Bombyx mori)、野蚕(Bombyxmandarina)、蓖麻蚕(Philosamia cynthia ricim)、樟蚕(Dictyoplocajapanica)、樗蚕(Philosamia cynthia pryeri)、柞蚕(Antheraea pernyi)、日本柞蚕(Antheraea yamamai)、野天蚕(Antheraea polyphymus)、苜蓿尺蠖(Atographa califorica)、茶尺蠖(Ectropis obliqua)、甘兰夜蛾(Mamestra brassicae)、斜纹夜蛾(Spodoptera littoralis)、秋粘虫(Spodoptera frugiperda)、粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)、行军虫(Thaumetopoea wilkinsoni)、棉铃虫(Heliothis armigera)、美国棉铃虫(Heliothis zea)、烟青虫(Heliothis assulta)、烟草夜蛾(Heliothis virescens)、东方粘虫(Pseudaletia separata)或舞毒蛾(Lymantria dispar)；优选的，所述杆状病毒的昆虫宿主为家蚕；

所述的感染是将重组杆状病毒通过口食来感染1-5龄的昆虫幼虫或蛹体，或透过表皮来感染1-5龄的昆虫幼虫或蛹体；优选的，所述的感染是将重组家蚕杆状病毒感染家蚕细胞，或将重组家蚕杆状病毒穿刺接种1-5龄的家蚕幼虫或蛹体；其中，所述的蛹体优选为1-2天的早期嫩蛹。

8.由权利要求6或7述生物学制备方法制备得到的芋螺毒素。

9.一种镇痛、神经修复或戒断毒瘾的药物组合物，其特征在于：包括有效量的权利要求8所述的芋螺毒素和药学上可接受的辅料。

10.一种镇痛的注射或口服制剂，其特征在于：包括治疗上有效量的权利要求8所述的芋螺毒素和终浓度为25-35％的脂肪酸。