[发明专利]一种比伐卢定的制备方法

权利要求书

1.一种比伐卢定的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：取甘氨酸与氯树脂经第一偶联获得甘氨酸-氯树脂，取氨基酸依次经第二偶联获得第一肽树脂，经第一裂解获得序列如SEQ ID No.1所示的第一片段；

步骤2：取亮氨酸与固相载体经第三偶联获得亮氨酸-树脂，取氨基酸依次经第四偶联获得序列如SEQ ID No.2所示的第二肽树脂；

步骤3：取所述第一片段与所述序列如SEQ ID No.2所示的第二肽树脂固相偶联获得比伐卢定肽树脂，经第二裂解、纯化，即得；

所述第二偶联的偶联剂为HOBt与DIC的混合物，HOBt、PyBOP与DIPEA的混合物，HOAt、PyAOP与DIPEA的混合物，HBTU、HOBt与DIPEA的混合物，HATU、HOAt与DIPEA的混合物。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1中所述第二偶联的偶联剂为HOBt、PyBOP与DIPEA的混合物。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述氯树脂为2-CTC-树脂。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1中所述第一裂解所用裂解剂为三氟乙醇和二氯甲烷的混合试剂，所述混合试剂中三氟乙醇与二氯甲烷的体积比为1:4。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3中所述固相偶联的偶联剂为DIC与HOBt的混合物，HBTU、HOBt与DIPEA的混合物或HATU、HOAt与DIPEA的混合物。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3中所述固相偶联的偶联剂为HATU、HOAt与DIPEA的混合物。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3中所述第二裂解的裂解剂为三氟乙酸、苯甲硫醚、苯酚、1，2-乙二硫醇、水和三异丙基硅烷的混合试剂。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，以体积百分数计，所述裂解剂中包括三氟乙酸81-89％，苯甲硫醚2-6%，苯酚2-6％，三异丙基硅烷1-3％，1,2-乙二硫醇2-6%，余量为水。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1中所述第一肽树脂替代度为0.5~1.0mmol/g。

10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2中所述固相载体选自PAM Resin、HMPA-AM Resin、HMPA-MBHA Resin或者Wang Resin。

11.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2中所述亮氨酸-树脂的替代度为0.4~0.8mmol/g。

12.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1具体为：取甘氨酸与氯树脂经第一偶联获得甘氨酸-氯树脂，去保护后，依次偶联Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-D-Phe-OH，获得第一肽树脂，再经第一裂解获得序列如SEQ ID No.1所示的第一片段。

13.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2具体为：取亮氨酸与固相载体经第三偶联获得亮氨酸-树脂，去保护后，依次偶联Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH和Fmoc-Gly-OH获得序列如SEQ ID No.2所示的第二肽树脂。