[发明专利]模拟移动床色谱拆分匹诺塞林对映体的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种手性药物的拆分技术，特别是匹诺塞林的模拟移动床色谱分离方法。 

背景技术

匹诺塞林(pinocembrin)，化学名称为2,3-二氢-5,7-二羟基-2-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(2,3-d ihydro-5,7-d ihydroxy-2-phenyl-4H-1-benzopyran-4-one)，最初是从蜂胶中得到的一种具有多种生物活性的黄烷酮类化合物。在药理筛选的过程中首次发现消旋的匹诺塞林对急性脑缺血大鼠的神经血管单元(NVU)具有显著的保护活性，可明显降低脑水肿百分率和脑梗塞体积，改善神经行为学特征，有治疗急性脑缺血的作用，具有良好的开发前景。匹诺塞林的分子结构中含有1个手性中心，存在1对光学异构体，天然立体构型为S构型，在植物中含量很低，而对于R构型匹诺塞林的生物活性未见报道，因此，有必要对其消旋体进行拆分。 

近年来，模拟移动床色谱技术已在药物分离方面取得了快速发展，特别是在手性药物的拆分方面显示出独特的优势，目前，使用模拟移动床色谱分离匹诺塞林对映体的方法迄今仍未见公开报道。本方法采用模拟移动床色谱拆分匹诺塞林对映体具有高效、节约成本，并能实现连续分离等特点。 

    

发明内容

本发明的目的是提供一种匹诺塞林对映体模拟移动床拆分的方法。 

本发明为实现上述发明目的采用的技术方案如下：一种匹诺塞林对映体的模拟移动床的拆分方法，其特征在于用涂敷型直链淀粉-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)为固定相，用甲醇流动相，用模拟移动床系统从匹诺塞林外消旋物中拆分出高纯度的R-匹诺塞林和S-匹诺塞林，包括以下步骤： 

(1)、将匹诺塞林外消旋体溶于甲醇中，浓度为：0~50g/L；

(2)、用模拟移动床拆分匹诺塞林外消旋体；

(3)、浓缩、重结晶得到高纯度的两种匹诺塞林对映体。

本发明具有以下技术效果：本发明采用模拟移动床系统，从匹诺塞林的外消旋体中拆分出具有光学纯度的匹诺塞林对映体，工艺简单，生产连续自动化，产品质量稳定，溶剂采用正己烷与醇类有机改性剂的混合物，可回收利用，无污染，实现清洁生产。 

具体实施方式

1、设备及条件选择 

采用模拟移动床色谱系统，该系统包括洗脱泵、进样泵、萃取泵、色谱柱、电磁阀、单向阀、控温器和PLC系统控制器及计算机组成。样品溶液和洗脱液分别从样品液入口和洗脱液入口注入系统，匹诺塞林的两个对映体分别从提余液和提取液两个出口中流出，每隔一定的时间样品液和洗脱液入口，提取液和提余液出口沿流动相流动的方向切换至下一支色谱柱。

2、色谱柱填料及流动相(溶剂)选择 

以涂覆型直链淀粉-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)为手性固定相，填料粒度为1~150um，微粒越小，粒径分布越窄，越有利于分离；但粒径越小系统压力越大，最适宜的粒径范围是20~40um；

流动相(溶剂)为甲醇。

3、分离步骤 

A、样品用甲醇溶解，浓度为0~50g/L，色谱系统由4~12根制备柱组成，分为4个区，色谱柱数目越多分离越好，但系统的复杂度及系统压力越高，最适合的是4~8根，通过模拟移动床色谱系统的控制器，定期控制电磁阀的开闭，使进样口、萃取液出口及残余液出口沿流动相的方向定期变换，使匹诺塞林的两个对映体从提取液和提余液两个出口流出系统；

B、得到的产品溶液，经过浓缩、重结晶得到纯度在96%以上的合格产品；

C、成品检验

流动相：甲醇

流速：1mL/min

泵：江苏汉邦科技分析泵

色谱柱：Chiralpak AD-RH柱(4.6*250mm)

检测器：江苏汉邦科技紫外检测器

检测波长：290nm

下面结合实例进一步说明本发明：

分离实例一

1、样品的配制：样品用甲醇溶解，制成浓度为5g/L，经0.45um有机滤膜过滤后备用；

2、模拟移动床参数的选择：确定参数如下：进样流速0.3mL/min，洗脱流速2.0mL/min，提取液流速1.2mL/min，提余液流速1.1mL/min，切换时间13min，温度控制在20-30℃；

3、产品收集：待模拟移动床系统运行稳定后，分别从两出口收集产品，减压浓缩、重结晶后得到最终产品；