[发明专利]大环内酯抗生素Macrolactin A发酵菌及其发酵工艺有效

专利信息
申请号: 201210435023.6 申请日: 2012-11-05
公开(公告)号: CN102943054A 公开(公告)日: 2013-02-27
发明(设计)人: 何山;严小军;王洪强 申请(专利权)人: 宁波大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12P17/08;C12R1/07
代理公司: 宁波奥圣专利代理事务所(普通合伙) 33226 代理人: 程晓明
地址: 315211 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 内酯 抗生素 macrolactin 发酵 及其 工艺
【权利要求书】:

1.一种大环内酯抗生素Macrolactin A发酵菌,其特征在于:该菌为ESB-2菌株,分类命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),保藏编号为CGMCC No.6554,于2012年09月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。

2.根据权利要求1所述的大环内酯抗生素MacrolactinA发酵菌,其特征在于:该菌株在平板培养上,菌落呈圆形,浅黄色半透明,表面光滑湿润,边缘规则,无晕环,中央凸起。

3.一种大环内酯抗生素Macrolactin A发酵菌的发酵工艺,其特征在于具体包括如下步骤:

(1)固体培养

将低温保藏的保藏编号为CGMCC No.6554的解淀粉芽孢杆菌涂布于固体平板培养基上,于28.4℃,静置培养24h,其中所述的每升固体培养基的配制如下:海水1L、蛋白胨12.8mg、酵母粉1g、磷酸亚铁0.01g、琼脂15g;

(2)种子培养

取生长良好的平板菌种,接种于装液量为62.3%的种子培养基中,于28.4℃,150r/mim的条件下,培养48h,其中所述的每升种子培养基的配制如下:海水1L、蛋白胨12.8mg、酵母粉1g、磷酸亚铁0.01g;

(3)发酵培养

取生长良好的种子液,按体积分数5%的接种量接种于装液量为62.3%的发酵培养基中,于28.4℃,150r/mim的条件下,培养48h,其中所述的每升发酵培养基的配制如下:海水1L、蛋白胨12.8mg、酵母粉1g、磷酸铁0.01g;

(4)发酵液体处理

代谢产物的萃取:取发酵液加入等体积的乙酸乙酯充分萃取一次,收集萃取液,再取萃余液加入等体积的乙酸乙酯重复萃取一次,合并两次萃取所得萃取液,旋转蒸发至干,再次溶于1ml90%的甲醇溶液中,12000r/min离心15min,取含大环内酯抗生素Macrolactin A的上清液;

(5)Macrolactin A的制备

用高效液相色谱或者逆流色谱对Macrolactin A进行分离纯化,得到大环内酯抗生素Macrolactin A单体。

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