[发明专利]昆虫、昆虫血淋巴及其组装活性物和应用

说明书

技术领域：

本发明涉及生物技术领域，涉及昆虫血淋巴的收集和稳定保存的方法及其应用。具体地说，本发明涉及对含有酚氧化酶原激活系统或/和Toll信号传递途径(系统)组成成分的昆虫血淋巴的收集方法、针对酚氧化酶原激活系统或/和Toll信号传递途径(系统)生物活性稳定的昆虫血淋巴收集方法及其血淋巴储存方法与条件、利用昆虫及其血淋巴的酚氧化酶原激活系统的生物活性以及Toll信号传递系统的生物活性、昆虫血淋巴酚氧化酶原激活系统和Toll信号传递系统的活性成分及其重新组装的生物活性、从昆虫血淋巴获得模式识别受体、级联系统丝氨酸蛋白酶、酚氧化酶及其酶原、抗菌肽等生物活性物质及其生物活性进行微生物检测。

本发明还涉及昆虫血淋巴的生物活性、血淋巴的收集和稳定保存的方法、体外活性组装物的制备、以及昆虫血淋巴及组装活性物的应用。具体地说，本发明涉及对含有酚氧化酶原激活系统或/和Toll信号传递途径(系统)组成成分的昆虫及其血淋巴的研究、获得具有稳定生物活性的酚氧化酶原激活系统或/和Toll信号传递途径(系统)的昆虫血淋巴收集方法及其储存方法与条件、针对昆虫及其血淋巴的酚氧化酶原激活系统的生物活性以及Toll信号传递系统的生物活性研究、针对昆虫血淋巴酚氧化酶原激活系统和Toll信号传递系统的活性成分及其体外组装物的生物活性研究、针对从昆虫血淋巴获得模式识别受体/级联系统丝氨酸蛋白酶/酚氧化酶及其酶原/抗菌肽等生物活性物质及其生物活性的研究，以及上述研究在微生物检测领域的应用。

背景技术：

昆虫血淋巴是其血液和淋巴液的混合物，在昆虫的开放式循环系统中循环，是昆虫代谢的重要场所，也是代谢过程中各种物质储存和交换的场所，在其防御、抗冻、免疫、损伤应答等方面起重要作用。

昆虫血淋巴中含有酚氧化酶原激活系统(Pro-phenoloxidase activated system，Pro-PO-AS)以及由酚氧化酶原激活系统相关的Toll信号传递系统。上述两种免疫系统是昆虫体内的重要的先天性识别和防御系统，在其防卫体系中起极为重要的作用，对入侵昆虫体内的微生物具有很强的识别与杀灭作用。酚氧化酶原激活系统是由各种关联性蛋白因子构成的一个复杂的酶级联反应系统，其主要成分除了酚氧化酶原(Pro-Phenoloxidase，Pro-PO)、酚氧化酶(phenoloxidase，PO)以外，同时包括关联性的各种模式识别蛋白、系列丝氨酸蛋白酶(原)及其相应的各种调节剂；Toll信号传递系统是由酚氧化酶原激活系统调控、激活的一个信号传递系统，由各种关联蛋白因子构成了一个复杂的信号传递系统，除含有与酚氧化酶原激活系统共有的各种模式识别蛋白、系列丝氨酸蛋白酶(原)及其相应的各种调节剂外，亦包含抗菌肽及其诱导合成相关蛋白因子。

酚氧化酶原激活系统(Pro-PO-AS)通过识别微生物固有成分而被激活，随后产生一系列具有生理活性的物质(包括激活Toll信号传递系统)，并通过多种方式参与宿主防御反应：包括提供调理素、促进血细胞吞噬作用、包囊作用、结节形成以及介导凝集和凝固、产生杀菌物质等。昆虫体内Pro-PO-AS的末端成分之一酚氧化酶(Phenoloxidase，PO)以无活性酶原(Pro-PO)形式存在，当昆虫受到微生物感染后，通过激活酚氧化酶原激活系统，将Pro-PO转变为有活性的PO。同时，激活的酚氧化酶原激活系统也可激活Toll信号传递系统，诱导机体产生抗菌肽等免疫活性物质。