[发明专利]RET融合基因检测的PCR引物、试剂盒和液相芯片有效
申请号: | 201210448645.2 | 申请日: | 2012-11-09 |
公开(公告)号: | CN103805688A | 公开(公告)日: | 2014-05-21 |
发明(设计)人: | 陈昌华;陈菲;许昌有 | 申请(专利权)人: | 益善生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C40B40/06 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 万志香 |
地址: | 510663 广东省广州市广州科*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | ret 融合 基因 检测 pcr 引物 试剂盒 芯片 | ||
1.一种检测RET融合基因的PCR引物,其特征是,所述PCR引物为:针对K15;R12的SEQID NO.1和SEQ ID NO.4、针对K16;R12的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.5、针对K22;R12和K23;R12的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.6、针对K24;R8的SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.7、针对K24;R11的SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7、和/或针对C1;R12的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.8。
2.一种检测RET融合基因的PCR试剂盒,其特征是,包括有权利要求1所述的PCR引物。
3.根据权利要求2所述的PCR试剂盒,其特征是,所述试剂盒还包括有阳性对照品,所述阳性对照品为:针对K15;R12的含有SEQ ID NO.1和与SEQ ID NO.4反向互补配对的序列的核酸片段、针对K16;R12的含有SEQ ID NO.1和与SEQ ID NO.5反向互补配对的序列的核酸片段、针对K22;R12和K23;R12的含有SEQ ID NO.1和与SEQ ID NO.6反向互补配对的序列的核酸片段、针对K24;R8的含有SEQ ID NO.2和与SEQ ID NO.7反向互补配对的序列的核酸序列、针对K24;R11的含有SEQ ID NO.3和与SEQ ID NO.7反向互补配对的序列的核酸片段、和/或针对C1;R12的含有SEQ ID NO.1和与SEQ ID NO.8反向互补配对的序列的核酸片段。
4.根据权利要求3所述的PCR试剂盒,其特征是,所述阳性对照品为:针对K15;R12的SEQ ID NO.9、针对K16;R12的SEQ ID NO.10、针对K22;R12的SEQ ID NO.11、针对K23;R12的SEQ ID NO.12、针对K24;R8的SEQ ID NO.13、针对K24;R11的SEQ ID NO.14、和/或针对C1;R12的SEQ ID NO.15。
5.一种RET融合基因检测的液相芯片,其特征是,包括有:
(A)权利要求1所述的PCR引物;
(B)针对RET融合基因不同融合类型分别设计的ASPE引物:每条ASPE引物由5’端的tag序列和3’端针对目的融合类型的特异性引物序列组成,所述特异性引物序列为:针对K15;R12的SEQ ID NO.23、针对K16;R12的SEQ ID NO.24、针对K22;R12的SEQ ID NO.25、针对K23;R12的SEQ ID NO.26、针对K24;R8的SEQ ID NO.27、针对K24;R11的SEQ ID NO.28、和/或针对C1;R12的SEQ ID NO.29;所述tag序列选自SEQ ID NO.16~SEQ ID NO.22;
(C)有anti-tag序列包被的、具有不同颜色编码的微球,所述anti-tag序列与微球连接中间还设有间隔臂序列;所述anti-tag序列选自SEQ ID NO.30~SEQ ID NO.36,且所述anti-tag序列能相应地与(B)中所选的tag序列互补配对。
6.根据权利要求5所述的所述液相芯片,其特征是,所述ASPE引物为:针对K15;R12的由SEQ ID NO.16和SEQ ID NO.23组成的序列、针对K16;R12的由SEQ ID NO.17和SEQ IDNO.24组成的序列、针对K22;R12的由SEQ ID NO.18和SEQ ID NO.25组成的序列、针对K23;R12的由SEQ ID NO.19和SEQ ID NO.26组成的序列、针对K24;R8的由SEQ ID NO.20和SEQ ID NO.27组成的序列、针对K24;R11的由SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.28组成的序列、和/或针对C1;R12的由SEQ ID NO.22和SEQ ID NO.29组成的序列。
7.根据权利要求5或6所述的液相芯片,其特征是,所述间隔臂为5-10个T。
8.一种用于检测RET融合基因的特异性引物,其特征是,所述特异性引物为:针对K15;R12的SEQ ID NO.23、针对K16;R12的SEQ ID NO.24、针对K22;R12的SEQ ID NO.25、针对K23;R12的SEQ ID NO.26、针对K24;R8的SEQ ID NO.27、针对K24;R11的SEQ ID NO.28、和/或针对C1;R12的SEQ ID NO.29。
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