[发明专利]一种抗病毒中药组合物的制备方法及指纹图谱的测定方法

权利要求书

1.一种抗病毒中药组合物的连续超声逆流提取液的指纹图谱测定方法，该中药组合物由如下重量份的原料药制成：连翘200-300 、麻黄60-100 、大黄40-60 、鱼腥草200-300、金银花200-300 、板蓝根200-300、广藿香60-100、绵马贯众200-300、红景天60-100、薄荷脑5-9、苦杏仁60-100 、甘草60-100 、石膏200-300，其制备方法为：

(1) 按照原料药重量比例称取中药材，净选；

(2) 广藿香碎断，加5-8倍量水提取挥发油，提油时间4小时，收集挥发油，备用；提取液过滤后，残渣弃去，滤液备用；

(3) 连翘、麻黄、鱼腥草、大黄采用连续超声逆流提取，得连续超声逆流提取液；

(4) 金银花、石膏、板蓝根、绵马贯众、甘草、红景天，加7-11倍量水煎煮至沸，加入苦杏仁、煎煮2次，每次0.5-2.5小时，提取液合并过滤，所得滤液与步骤（2）广藿香提油后的滤液合并，浓缩成在60℃时测定相对密度为1.10-1.15的清膏，加乙醇，调节至醇浓度为70%，冷藏放置，过滤，回收乙醇至无醇味，得清膏备用；

(5) 将步骤（4）所得清膏与步骤（3）所得的连续超声逆流提取液，浓缩至在60℃时测定相对密度为1.15-1.20的清膏，干燥，得干膏粉，备用；

（6）步骤（5）所得干膏粉、步骤（2）所得挥发油与薄荷脑共同构成该中药组合物的活性成分；

其特征在于：所述步骤（3）的连续超声逆流提取的提取溶媒为50%-85%乙醇，提取时间30-120分钟，超声波频率20-50 kHz，步骤（3）所得连续超声逆流提取液的指纹图谱测定方法如下：

色谱条件：色谱柱为C₁₈柱，柱流速0.2-0.8 ml.min^-1，检测波长225-232 nm，流动相B为乙腈，A为0.1%磷酸；梯度洗脱：0～4min，14%～14%B；4～7min，14%～35%B；7～9.5min，35%～70%B；9.5～12min，70%～75%B；12～12.5min，75%～14%B；12.5～14.5min，14%B；

供试品溶液的制备：取步骤（3）中超声逆流提取液，用0.22 μm 滤膜过滤，即得；

测定法：精密吸取供试品溶液0.1-1.5μl，注入超高压液相色谱仪，记录色谱图，即得。

2.如权利要求1所述的连续超声逆流提取液指纹图谱测定方法，其特征在于所述连续超声逆流提取的提取溶媒为70%乙醇，提取时间60分钟，超声波频率27kHz。

3.如权利要求1所述的连续超声逆流提取液指纹图谱测定方法，其特征在于所述连续超声逆流提取的提取溶媒为85%乙醇，提取时间30分钟，超声波频率50kHz。

4.如权利要求1所述的连续超声逆流提取液指纹图谱测定方法，其特征在于所述连续超声逆流提取的提取溶媒为50%乙醇，提取时间120分钟，超声波频率20kHz。

5.如权利要求1-4中任一所述的连续超声逆流提取液指纹图谱测定方法，其特征在于所述中药组合物制剂是由如下重量份的原料药制成：

连翘 200 、金银花 300 、板蓝根 200、大黄 60 、广藿香 60、绵马贯众 300 、红景天60 、薄荷脑 9 、麻黄 60 、苦杏仁 100、鱼腥草 200 、甘草 100 、石膏200。

6.如权利要求1-4中任一所述的连续超声逆流提取液指纹图谱测定方法，其特征在于所述中药组合物制剂由下列重量份的原料药制成：

连翘 300 、金银花 200 、板蓝根 300 、大黄 60、广藿香100、绵马贯众 200、红景天60、薄荷脑 5 、麻黄100 、苦杏仁 60 、鱼腥草 300、甘草 60 、石膏 300。