[发明专利]一种大菱鲆C型溶菌酶及其构建和应用无效
| 申请号： | 201210452265.6 | 申请日： | 2012-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN102952788A | 公开（公告）日： | 2013-03-06 |
| 发明（设计）人： | 孙黎;于兰萍 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N9/36 | 分类号： | C12N9/36;C12N15/56;C12N15/70;A61K38/47;A61P31/04 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 周秀梅;李颖 |
| 地址： | 266071*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 大菱鲆 型溶菌酶 及其 构建 应用 | ||
1.一种大菱鲆C型溶菌酶，其特征在于：溶菌酶为序列表SEQ I D No.1中的氨基酸序列所示。
2.一种权利要求1所述的大菱鲆C型溶菌酶的制备方法，其特征在于：
1）菌株BL21/pSmLysC的构建：
以大菱鲆cDNA为模板，用引物F1和R1进行PCR扩增，PCR产物纯化后与载体pEASY-E2于室温连接2－8小时，连接混合液转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选转化子，即为BL21/pSmLys C；所述F1为5’-GATATCATGAAAGTCTTCGAACGCTGT-3’，R1为5’-GATATCCACACCACATCCTGCCAC-3’；
2）溶菌酶的表达和制备
将上述步骤1）的BL21/pSmLysC在含有安卡青霉素的LB培养基上培养至OD600为0.5,加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷使其终浓度达到1mM，28℃继续摇动培养5－6小时，而后用亲和层析柱纯化重组蛋白，即为SEQ IDNo.1中氨基酸序列所示。
3.一种权利要求1所述的大菱鲆C型溶菌酶的应用，其特征在于：所述溶菌酶可作为革兰氏阳性菌的抑菌剂。
4.按权利要求3所述的大菱鲆C型溶菌酶的应用，其特征在于：所述革兰氏阳性菌为藤黄微球菌（Micrococcus luteus）、海豚链球菌（Streptococcus iniae）或金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院海洋研究所，未经中国科学院海洋研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201210452265.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
