[发明专利]TUFT1在制备肝癌诊断和治疗制剂中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及分子生物学特别是基因诊断和基因治疗领域，尤其是TUFT1在制备肝癌诊断和治疗制剂中的应用。

背景技术

肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是世界上发病率和致死率较高的恶性肿瘤之一，全世界每年新发HCC病人中约50%在中国。HCC的发生发展和恶性转移机制是一个由多基因、多信号通路参与的复杂的网络调控系统。

哺乳动物TUFT1基因(编码Tuftelin1蛋白)最早是由Deutsch从牛成釉细胞的cDNA文库中鉴别、克隆并完成测序工作[Z.Mao等，The human Tuftelin1gene:cloning and characterization,Gene 279(2001)181-196.]。之后，发现Tuftelin1蛋白在许多类型的组织中表达，包括矿化和非矿化组织均可表达[D.Deutsch等，The human Tuftelin 1gene and the expression of Tuftelin1 in mineralizing and nonmineralizing tissues,Connect Tissue Res.43(2002)425-434]。人类的TUFT1基因是单拷贝基因，大小为43279bp，位于1q21.3染色体上；包含13个外显子，开放阅读框为1170bp，编码全长为390个氨基酸的蛋白质(Tuftelin1)，不含信号肽序列[I.Thesleff等，Epithelial–mesenchymal signaling during tooth development,Connect Tissue Res.32(1995)9-15]。目前研究Tuftelin1的功能主要是：参与牙釉质的矿化过程，促进牙齿的发育[J.V.Ruch等；Int.J.Dev.Biol.39(1995)51-68；A.S.Tucker等，Molecular genetics of tooth morphogenesis and patterning:the right shape in the right place,J.Dent.Res.78(1999)826-834]。

已有研究证实，Tuftelin1是一种缺氧诱导基因[P.T.Sharpe等，Test-tube teeth,Sci.Am.293(2005)34-41]，在生理情况下，Tuftelin1蛋白在肾脏和睾丸中表达量很高[D.Deutsch等，Tuftelin1-aspects ofprotein and gene structure,Eur.J.OralSci.106(Suppl.1)(1998)315-323]，而肾脏和睾丸常处于低氧环境。现有技术中没有TUFT1与肿瘤的关系的研究报导。

目前临床已有的甲胎蛋白(AFP)等辅助诊断标记物具有一定的假阴性率，可以造成部分患者漏诊，且检测AFP难以排除慢性活动性肝炎、生殖腺肿瘤的干扰，诊断特异性有待提高。临床诊断仍然需要特异性高、敏感性好的可以在血清中方便检出的肿瘤标记物来协助AFP诊断肝癌。因此，本领域对于特定癌症的准确和特异性的检测有迫切的需求。

发明内容

本发明的目的在于提供TUFT1在肝癌诊断和治疗中的应用。

在本发明的第一方面，提供一种TUFT1基因或其编码的蛋白(Tuftelin1)的下调剂的用途，用于制备预防、缓解或治疗肝癌的组合物。

在一个优选例中，所述的TUFT1基因或其编码的蛋白的下调剂选自：核酸抑制物(如干扰分子)，蛋白抑制剂，蛋白水解酶，蛋白结合分子，其能够在蛋白或基因水平上下调TUFT1基因或其编码的蛋白的表达或活性。

在另一优选例中，所述的TUFT1基因或其编码的蛋白的下调剂选自：以TUFT1基因或其转录本为靶序列、且能够抑制TUFT1基因表达或基因转录的干扰分子，包括：shRNA(小发夹RNA)、小干扰RNA(SiRNA)、dsRNA、微小RNA、反义核酸，或能表达或形成所述shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物；或特异性与TUFT1编码的蛋白结合的结合分子(如能够抑制TUFT1蛋白活性的抗体或配体)。

在另一优选例中，所述的TUFT1基因或其编码的蛋白的下调剂是选自下组序列的SiRNA：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6。

在另一优选例中，所述的TUFT1基因或其编码的蛋白的下调剂还用于：抑制肝癌细胞的侵袭、抑制肝癌细胞的增殖。