[发明专利]一种C20位脱羟基达玛烷型稀有人参皂苷及其苷元的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物领域，具体涉及一种C₂₀位脱羟基达玛烷型稀有人参皂苷及其苷元的制备方法，即结合半合成制备、色谱分离纯化等多种手段获得C₂₀位脱羟基达玛烷型稀有人参皂苷及其苷元的方法。

背景技术

人参属植物（人参、西洋参、三七等）以其历史悠久，疗效确切，成为目前世界上最受欢迎和用量最大的中草药之一。现代药理学研究表明其主要活性成分人参皂苷具有抗炎、抗氧化、神经保护、改善心血管供血等多种作用（L.P.Christensen，AdvFoodNutrRes，2008，55，1；W.D.Rausch等，Acta Neurobiol Exp，2006，66，369；A.A.Pawar.等，Phytother Res，2007，21，1221）。达玛烷型人参皂苷的C₂₀位多具有羟基，且在人参属植物中含量较多。经加热处理后，其所含达玛烷型皂苷及其苷元的C₂₀位羟基易发生脱水反应，形成双键，生成双键异构的系列C₂₀位脱羟基达玛烷型稀有人参皂苷及其苷元（结构式B和C化合物）。随着研究的深入，这类含量甚微的稀有皂苷类成分显示出良好的肿瘤细胞毒活性，体现在诱导肿瘤细胞分化，抑制肿瘤细胞增殖，诱导细胞凋亡等多个方面，对肿瘤临床治疗及预防具有较高的药用价值（Tian JW等，Anticancer Res，2004，24，3653；Nguyen HT等，Chem Pharm Bull，2010，58(8)：1111-1115）。此外，人参皂苷Rk₁、Rg₅能提高小鼠的认知能力，改善记忆减退症状，具有益智活性（张晶等，吉林农业大学学报，2006，28(3)：283-284）。人参皂苷Rk₃、Rg₅显示出良好的抗血小板凝集作用(Lee WM等，J Pharm Pharmacol，2008，60，1531-1536；Lee JG等，Pharmazie，2009，64，602-604)。人参皂苷Rg₆、F₄等则在免疫系统方面具备潜在活性（Nguyen HT等，Arch Pharm Res，2011,34(4)：681-685）。

目前这类稀有皂苷多从人参属植物中直接分离提取获得（Liao PY等，JAgric Food Chem，2008,56,1751-1756），但由于其在原植物中含量甚微，提取成本较大，而结构复杂等因素导致化学全合成困难，所以采用半合成制备的方式不失为一种上佳之选。当前市场上C₂₀位脱羟基达玛烷型稀有人参皂苷及其苷元的商品化对照品鲜见，同时由于其成对产物极性相似，采取传统化学手段分离困难，产率低且纯度差。因此制备问题成为进一步研究C₂₀位脱羟基达玛烷型稀有人参皂苷及其苷元的工作中一个亟待解决的关键性技术问题，对推进该类成分及人参属植物的药理活性研究具有重要的意义。

发明内容

本发明目的在于针对现有技术的不足，提供一种C₂₀位脱羟基达玛烷型稀有人参皂苷及其苷元的制备方法。

本发明以人参皂苷Rg₂、Rh₁、Rg₃、Rs₃、Rh₂、原人参二醇和原人参三醇为原料（结构式A)，在酸性条件下发生一步脱水反应，其C₂₀位羟基去除，即可生成双键异构的系列C₂₀位脱羟基达玛烷型稀有人参皂苷及其苷元（结构式B和C）。后采用制备液相富集目标化合物，浓缩、冻干后即得。

反应式如下：

其中R₁表示-OH、-Oglc(2-1)glc、-Oglc(2-1)glc-Ac或-Oglc；

R₂表示-H、-OH、-Oglc(2-1)rha或-Oglc。

其中原料化合物A与含酸的醇水溶液的重量体积比（毫克/毫升）为1∶1～1∶10。

所述醇优选甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁醇、乙二醇或丙三醇，更优选甲醇。

其中醇在溶液中的浓度优选20～80％，更优选30～70％，为体积百分比。

所述酸优选甲酸、乙酸、盐酸、硫酸或硝酸，更优选甲酸。