[发明专利]一种抗小麦黄花叶病毒转基因小麦代谢物检测方法有效
申请号: | 201210460498.0 | 申请日: | 2012-11-15 |
公开(公告)号: | CN103808818A | 公开(公告)日: | 2014-05-21 |
发明(设计)人: | 付伟;王玲;贺艳;朱振营 | 申请(专利权)人: | 中国检验检疫科学研究院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞;张庆敏 |
地址: | 100029 北京市朝*** | 国省代码: | 北京;11 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 小麦 花叶 病毒 转基因 代谢物 检测 方法 | ||
1.一种抗小麦黄花叶病毒代谢物检测方法,包括以下步骤:
1)将抗小麦黄花叶病毒转基因小麦的种子脱壳,磨成粉状,加入提取溶液于4℃浸提;
2)离心后干燥,加入内标物;
3)干燥,加入衍生试剂;
4)采用气相色谱-质谱联用的方法对衍生后的样品进行分析;
其特征在于,步骤1)中所述提取溶液为体积比为2:3:3的水、乙腈和异丙醇的混合液。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,
步骤4)中色谱条件为:柱箱程序:60℃保持1min,然后每分钟10℃升温至325℃,保持10min,1min后运行;前进样器:10μl;进样量:1μl;载气:He,99.999%;压力:10.473psi;色谱柱:DB-5ms:1611.66442;DB-5ms325℃:30m×0.25mm×0.25μm;
步骤4)中质谱条件为:EI能量:70eV;离子源温度:230℃;四级杆温度:150℃;溶剂延迟:7min。
3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤1)中为向100mg粉末中加入1mL提取溶液于4℃浸提。
4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,步骤1)中浸提时间为20min。
5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中所述离心是指在4℃,12200g/min,离心2min。
6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中使用的内标物为十四酸。
7.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤3)中所述衍生试剂的制备方法为:将10μl盐酸甲氧胺溶于40mg/ml吡啶中,30℃,1500g,振荡90min,然后加入N-甲基-N-三甲基硅烷三氟乙酰胺和1%三甲基氯硅烷90μl,37℃,振荡30min,即得。
8.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,步骤3)中衍生时间为30min或90min。
9.一种用于抗小麦黄花叶病毒转基因小麦代谢物GC-MS检测的提取试剂,其特征在于,所述提取试剂为体积比为2:3:3的水、乙腈和异丙醇的混合液。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国检验检疫科学研究院,未经中国检验检疫科学研究院许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201210460498.0/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:一种全自动卧式液压榨油机
- 下一篇:一种微博搜索方法及装置