[发明专利]断肠草鉴别的引物及PCR方法无效
| 申请号： | 201210464624.X | 申请日： | 2012-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN103820529A | 公开（公告）日： | 2014-05-28 |
| 发明（设计）人： | 黄璐琦;袁媛;李旻辉;崔占虎;蒋超 | 申请（专利权）人： | 中国中医科学院中药研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100700 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 断肠 鉴别 引物 pcr 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种鉴定断肠草的特异引物F1、F2，其序列为：F1：5’-TCTCCGCCCTCTGCTCTA-3’，F2：5’-GGAAGAAAGGAGTTTTTATGAGG-3’。
2.一种断肠草的PCR鉴定方法，其特征在于，包括下列步骤：
a)从所述材料中提取到DNA样品；
b)用权利要求1所述的引物进行PCR反应，扩增反应体系包括：10×buffer缓冲液2μL，dNTP1.6μL，引物各0.5μL，EX Tap酶0.2μL，DNA0.5μL，灭菌蒸馏水14.7μL；反应条件：解链温度95℃，时间5min，退火温度57℃，时间30s，复性温度72℃，时间为1min40s，35个循环后72℃延伸，时间为7min；
c)电泳所述扩增产物，如果存在分子量约为300bp的单一条带，则确定所检材料为断肠草。
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