[发明专利]促进间充质干细胞体外增殖及延缓衰老的活性基质胶有效

专利信息
申请号: 201210469902.0 申请日: 2012-11-19
公开(公告)号: CN103820386A 公开(公告)日: 2014-05-28
发明(设计)人: 韩为东;郝好杰;付小兵;刘杰杰;赵亚力;伍志强 申请(专利权)人: 中国人民解放军总医院
主分类号: C12N5/0775 分类号: C12N5/0775
代理公司: 北京北新智诚知识产权代理有限公司 11100 代理人: 王淳
地址: 100853*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 促进 间充质 干细胞 体外 增殖 延缓 衰老 活性 基质
【权利要求书】:

1.一种促进间充质干细胞体外增殖及延缓衰老的活性基质胶,其特征在于,其是通过以下方法制得:

(1)将切除的脐带置于保存液内,所述保存液为含100u的青霉素及100μg的链霉素的0.01mol/L的磷酸盐缓冲液,在4℃下保存直至处理;

(2)在无菌条件下用磷酸盐缓冲液冲洗脐带,以75%乙醇浸泡20秒,取出后分解成小段,去除血管及外膜,剪碎至呈0.5-1.5mm3的小块;

(3)转移至无菌离心管中,加入等体积的磷酸盐缓冲液置4℃下48小时,间或震荡,溶胀组织;

(4)用高速匀浆机4℃下匀浆打碎,再用玻璃匀浆器4℃匀浆后,再次用高速匀浆机4℃下尽量将匀浆打碎;

(5)以12000转离心30分钟,取上清,即得到所述活性基质胶成品。

2.如权利要求1所述的活性基质胶,其特征在于,步骤(1)中,所述脐带在4℃下保存不超过24小时。

3.如权利要求1所述的活性基质胶,其特征在于,步骤(2)中,所述用磷酸盐缓冲液冲洗脐带为冲洗3次。

4.如权利要求1至3中任一项所述的活性基质胶在促进间充质干细胞体外增殖及延缓衰老中的用途,其特征性在于,所述的用途是将来源于动物或人体的间充质干细胞体外培养于所述活性基质胶,从而促进间充质干细胞体外增殖及延缓其复制性衰老。

5.如权利要求4所述的活性基质胶在促进间充质干细胞体外增殖及延缓衰老中的用途,其特征在于,将所述活性基质胶以磷酸盐缓冲液0.05-10%g/mL的浓度,于培养容器中37℃下包被2小时,或4℃下包被16-24小时后,用于所述间充质干细胞的体外培养。

6.一种促进间充质干细胞体外增殖及延缓衰老的活性基质胶的制备方法,其特征在于,所述制备方法的步骤如下:

(1)将切除的脐带置于保存液内,所述保存液为含100u的青霉素及100μg的链霉素的0.01mol/L的磷酸盐缓冲液,在4℃下保存直至处理;

(2)在无菌条件下用磷酸盐缓冲液冲洗脐带,以75%乙醇浸泡20秒,取出后分解成小段,去除血管及外膜,剪碎至呈0.5-1.5mm3的小块;

(3)转移至无菌离心管中,加入等体积的磷酸盐缓冲液置4℃下48小时,间或震荡,溶胀组织;

(4)用高速匀浆机4℃下匀浆打碎,再用玻璃匀浆器4℃匀浆后,再次用高速匀浆机4℃下尽量将匀浆打碎;

(5)以12000转离心30分钟,取上清,即得到所述活性基质胶成品。

7.如权利要求6所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述脐带在4℃下保存不超过24小时。

8.如权利要求7所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述用磷酸盐缓冲液冲洗脐带为冲洗3次。

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