[发明专利]大豆的组织培养方法

权利要求书

1.大豆的组织培养方法，其特征在于，所述组织培养方法包括将大豆成熟种子的子叶节作为外植体培养成再生植株。

2.如权利要求1所述的组织培养方法，其中，所述组织培养方法包括如下步骤：

1)获得大豆成熟种子的子叶节；

2)将所述子叶节作为外植体诱导愈伤组织；

3)将所述愈伤组织培养成体细胞胚；

4)将所述体细胞胚培养成再生植株。

3.如权利要求2所述的组织培养方法，其中，在第1)步中，所述子叶节为大豆成熟种子萌发5～7天后形成的子叶节。

4.如权利要求2所述的组织培养方法，其中，在第1)步中，获得子叶节的方法为：挑选健康无病斑的成熟大豆籽粒，清水漂洗干净，75％酒精消毒30～60秒，0.1％的Ca(ClO)₂消毒20～30分钟，期间摇晃5次左右，无菌水洗去Ca(ClO)₂残留，冲洗5～8次，接种在萌发培养基中，无菌萌发5～7天，光照16h/天，25±3℃；其中，所述萌发培养基的成分为：MSB+7g/L琼脂+30g/L蔗糖，pH值为5.8。

5.如权利要求2所述的组织培养方法，其中，在第2)步中，诱导愈伤组织的方法为：将子叶节的切面贴在诱导培养基上，暗培养3-5周，25±3℃。

6.如权利要求5所述的组织培养方法，其中，所述诱导培养基的成分为：MSB+4～6mg/L 2，4-D+7g/L琼脂+30g/L蔗糖，pH值为5.8。

7.如权利要求2所述的组织培养方法，其中，在第3)步中，将所述愈伤组织培养成体细胞胚的方法为：将所述愈伤组织接种在体细胞胚培养基上，培养3～5周，每两周换一次培养基，光照16h/天，25±3℃。

8.如权利要求2所述的组织培养方法，其中，在第4)步中，将所述体细胞胚培养成再生植株的方法包括：将所述体细胞胚移到生根培养基中，光照16h/天，25±3℃，培养3～4周，培养成再生苗。

9.如权利要求8所述的组织培养方法，其中，将所述体细胞胚培养成再生植株的方法还包括：将所述再生苗洗干净，移栽到灭菌的蛭石/珍珠岩＝3∶1的花盆中，浇灌无菌的MSB溶液，放到保湿盒中培养2周复壮，光照16h/天，25±3℃，然后移栽到大田中。

10.如权利要求1-9中任一所述的组织培养方法，其中，所述大豆选自：绥农28、垦丰16或合丰55。